2013/4/20 15:24:03 33true 2013/4/20 15:24:03 32true 2013/4/20 15:24:03 31true [目的] 观察葱白提取物对非酒精性脂肪肝（NAFLD）模型大鼠ATP合酶Fo亚基6（ATPase6）、ATP合酶Fo亚基8（ATPase8）表达的影响，并探讨其作用机制。[方法] 将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、葱白低剂量组、葱白中剂量组、葱白高剂量组，每组10只。采用高脂饮食喂养复制NAFLD模型大鼠，造模10周后，给予葱白提取物连续干预4周后，测定血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）的含量；苏木精-伊红（HE）染色法观察肝脏组织结构变化；Real time PCR检测大鼠肝脏组织中ATPase6、ATPase8 mRNA的表达。[结果] 与正常组比较，模型组出现明显肝脂肪变性，血清ALT、AST、TC、TG水平明显升高（P<0.05），ATPase6、ATPase8 mRNA的表达明显降低（P<0.05）；相较于模型组，葱白低、中、高剂量组肝脂肪变性均不同程度减轻；血清ALT、AST、TC、TG水平均不同程度降低（P<0.05），ATPase6、ATPase8 mRNA表达不同程度升高（P<0.05）。与葱白低剂量组比较，葱白中、高剂量组肝脂肪变性减轻明显，ALT、AST、TC、TG水平明显降低（P<0.05），ATPase6、ATPase8 mRNA水平明显升高（P<0.05），中、高剂量葱白组之间差异无统计学意义。[结论] 葱白提取物能够改善肝脂肪变性，可能与提高ATPase6、ATPase8的表达，增加肝线粒体ATP合成有关。]]> 2018/12/27 10:09:43 30true [目的] 研究葛根素对双氧水（H₂O₂）诱导小神经胶质BV-2细胞氧化应激损伤的保护作用，探讨其可能的作用机制。[方法] 体外常规培养BV-2细胞，用H₂O₂诱导细胞氧化应激损伤模型，并同时将细胞分为正常对照组、H₂O₂诱导模型组、H₂O₂+5 μmol/L葛根素组、H₂O₂+10 μmol/L葛根素组及H₂O₂+20 μmol/L葛根素组，CCK8试剂盒检测葛根素对细胞存活率的影响，相关试剂盒检测细胞匀浆中的氧化应激产物，免疫印迹方法检测核转录因子（Nrf2）、GCLC、NQO1及HO-1蛋白表达水平。[结果] H₂O₂能诱导BV-2细胞氧化应激损伤；与H₂O₂诱导组相比，不同剂量的葛根素可明显增加细胞的存活率、降低氧化应激产物丙二醛（MDA）及一氧化氮（NO）的释放及增强超氧化物歧化酶（SOD）酶活性，差异均有统计学意义（P<0.05）；免疫印迹结果显示葛根素可明显增强Nrf2的转位，并诱导GCLC、NQO1及HO-1蛋白的表达，与H₂O₂诱导组相比差异有统计学意义（P<0.05）。[结论] 葛根素可明显降低BV-2细胞的氧化应激损伤，其作用机制可能与活化Nrf2/ARE信号通路的有关。]]> 2018/12/27 10:09:43 29true [目的] 研究丹参多酚酸盐对大鼠肝硬化门静脉高压的抑制作用。[方法] 采用腹腔注射二甲基亚硝胺（DMN），每周前3天注射，共4周的方法制备肝硬化门静脉高压大鼠模型，设正常对照组、模型组（生理盐水）、丹参多酚酸盐[12、24、48 mg/（kg·d）]治疗组和秋水仙碱[0.1 mg/（kg·d）]治疗组，每组20只，疗程6周。测定血清中转氨酶、总胆红素（TBIL）、肝纤四项[（IV型胶原（C-IV）、Ⅲ型前胶原（PC-Ⅲ）、透明质酸酶（HA）、层粘连蛋白（LN）]含量和肝脏中羟脯氨酸（HYP）水平，通过苏木精-伊红（HE）染色观察肝脏组织病变，记录门静脉压（PVP）、门静脉血流量（PVF）、平均动脉压（MAP）和心率（HR）；测定肝脏中丙二醛（MDA）含量和抗氧化酶活性。[结果] 经丹参多酚酸盐[24、48 mg/（kg·d）]组治疗能够显著降低肝硬化门静脉高压大鼠血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、TBIL、IV型胶原（C-IV）、Ⅲ型前胶原（PC-Ⅲ）、透明质酸酶（HA）、HYP含量（P<0.05或P<0.01）；降低PVP和PVF（P<0.05）；提高肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性并降低MDA含量（P<0.05或P<0.01）。经丹参多酚酸盐48 mg/（kg·d）组治疗能够显著降低LN含量、提高MAP、降低HR（P<0.05或P<0.01）。经丹参多酚酸盐治疗能够明显改善肝硬化门静脉高压大鼠肝脏组织病变，以[48 mg/（kg·d）]组效果最为显著。[结论] 丹参多酚酸盐对大鼠肝纤维化门静脉高压具有一定的抑制作用，机制可能与丹参多酚酸盐能够降低氧化应激损伤。]]> 2018/12/27 10:09:43 28true [目的] 研究优呫吨酮铜（Ⅱ）配合物的细胞毒性以及与DNA的相互作用。[方法] 利用噻唑蓝（MTT）法研究优呫吨酮铜（Ⅱ）配合物对食管鳞癌细胞（ECA109）、胃癌细胞（SGC7901）和宫颈癌细胞（Hela）的体外抑制活性；利用荧光光谱法、紫外光谱法和圆二色谱法研究铜（Ⅱ）配合物与小牛胸腺DNA的相互作用。[结果] 优呫吨酮铜（Ⅱ）配合物对ECA109、SGC-7901和Hela细胞的抑制活性明显高于优呫吨酮，并且与DNA发生插入作用。[结论] 优呫吨酮铜（Ⅱ）配合物以插入方式与DNA结合，可能引起肿瘤细胞的DNA损伤，进而抑制细胞生长。]]> 2019/7/12 9:10:47 27true [目的] 运用网络药理学挖掘玉米须干预糖尿病的主要活性成分及其潜在靶标，探讨玉米须对糖尿病的干预机制。[方法] 运用中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）筛选玉米须活性成分的作用靶标。运用人类表型术语集（HPO），毒性与基因比较数据库（CTD）筛选糖尿病的靶标。采用STRING软件构建玉米须干预糖尿病的中药-疾病靶标网络。[结果] 得到12个活性成分和92个关键靶标，涉及糖尿病的靶标有8个。预测主要与AKT1，INSR，PRKACA等靶标有关。主要参与胰岛素信号通路和AMPK信号通路等途径。[结论] 玉米须可能通过调节AKT1和INSR蛋白参与胰岛素信号通路或AMPK信号通路对2型糖尿病起效，相关靶点及通路和现有的文献报道较为一致，可为其药用、食用的进一步开发提供参考依据。]]> 2019/7/12 9:10:47 26true [目的]观察黄芪甲苷减轻高糖诱导H9c2细胞损伤的作用机制。[方法]通过高糖孵育诱导H9c2心肌细胞损伤模型，MTT法测定细胞存活率，酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的含量，蛋白印迹（Western Blot）法检测细胞内IκB激酶β（IKK-β）、核转录因子κB（NF-κB）、p-NF-κB及TNF-α蛋白表达水平。[结果]给予高糖处理H9c2心肌细胞12 h能明显下调细胞存活率（P<0.05）；黄芪甲苷（20、40、80 μmol/L）预处理10 min可呈剂量依赖性增强细胞活力，降低细胞培养液上清中TNF-α和IL-6的含量（P<0.05），下调IKK-β蛋白表达（P<0.05），抑制NF-κB磷酸活化水平（P<0.05），并降低TNF-α蛋白表达（P<0.05）。[结论]黄芪甲苷可通过抑制IKK/NF-κB炎症通路过度激活减轻高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤。]]> 2019/6/19 16:46:29 25true [目的]研究灯盏花素（Bre）对庆大霉素所致大鼠急性肾损伤（AKI）的保护作用并探究其机制。[方法]取120只实验用Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、肾炎康复片组[800 mg/（kg·d），阳性药对照组]、灯盏花素低[6 mg/（kg·d）]、中[12 mg/（kg·d）]、高[24 mg/（kg·d）]剂量组，每组20只；采用连续7 d腹腔注射庆大霉素制备AKI大鼠模型；各组均每天1次口服给药，疗程14 d，正常对照组和模型对照组均同步给予生理盐水。测定24 h排尿量并测定24 h尿蛋白量（Pro），测定尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶（NAG酶）活性；测定血清尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）含量；称量肾脏质量并计算肾脏指数，免疫组织化学法法检测肾脏组织肾损伤分子-1（KIM-1）表达，苏木精-伊红（HE）染色法进行肾脏组织病理学检查并进行损伤评分，并测定肾脏组织氧化应激损伤指标和炎症细胞因子水平。[结果]与模型对照组比较，灯盏花素中、高剂量组和肾炎康复片组庆大霉素致AKI大鼠24 h排尿量、24 h Pro、尿NAG酶活性均显著降低（P<0.05或P<0.01）；血清BUN、Scr含量均显著降低，肾脏质量显著降低、肾脏指数显著减小，肾脏组织KIM-1表达降低，肾脏组织结构病变及细胞超微结构改变均明显改善，损伤评分显著降低，超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性升高且丙二醛（MDA）含量降低，肾脏组织巨噬细胞炎症蛋白-2（MIP-2）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量降低；差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。[结论]灯盏花素对庆大霉素致AKI大鼠肾组织损伤具有一定的保护作用，可能与其改善肾功能、抗氧化、抑制炎症有关。]]> 2019/6/19 16:46:29 24true [目的]观察2型糖尿病大鼠下肢股动脉血管中c-Jun氨基末端激酶（JNK1）的表达及中药桃仁的干预作用。[方法]雄性SD大鼠50只，随机分组为：空白对照组、模型对照组、早期干预组、桃仁高剂量组、桃仁低剂量组各10只；造模成功后，实验组予药物连续干预3周，取材进行实验检测，观察各项指标表达情况。[结果]1）模型组JNK1的表达较空白对照组明显升高；2）中药桃仁可有效降低JNK1表达，可明显改善糖尿病大鼠股动脉病变情况，减缓纤维化进程，以早期干预组效果最为明显，桃仁高剂量组效果良好，桃仁低剂量组效果欠佳。[结论]1）糖尿病股动脉病变可能与JNK1的表达、JNK1磷酸化及JNK1基因的表达相关；2）中药桃仁对糖尿病股动脉病变有明显改善作用，可有效预防并抑制股动脉病变的发展进程。]]> 2019/5/14 16:46:47 23true [目的]研究藏红花素（Crocin）对实验性2型糖尿病大鼠睾丸组织并发症损伤的保护作用。[方法]100只SD大鼠按体质量随机分为正常对照组、模型对照组、藏红花素25 mg/（kg·d）、50 mg/（kg·d）、100 mg/（kg·d）组，每组20只，灌胃给药，疗程12周；采用链脲佐菌素（STZ）连续3 d腹腔注射30 mg/（kg·d）的方法制备实验性2型糖尿病大鼠模型。测定各组大鼠空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）和糖化血红蛋白（GHb）水平，称量大鼠体质量、睾丸质量后计算睾丸指数，测定血清睾酮含量；采用苏木精-伊红（HE）染色对睾丸组织进行病理学检查，通过透射电镜观察睾丸组织超微结构改变；末端脱氧核苷酰基转移酶介导dUTP切口末端标记法（TUNEL）观察睾丸组织细胞凋亡状况。[结果]经藏红花素50~100 mg/（kg·d）治疗12周，2型糖尿病大鼠FBG显著降低、FINS显著升高、GHb显著降低（P<0.05或P<0.01）；体质量、睾丸指数和血清睾酮含量显著升高（P<0.05或P<0.01）。经藏红花素治疗12周，糖尿病大鼠睾丸组织曲细精管萎缩、生精细胞脱落、生精细胞数量减少等病理学改变以及细胞核固缩、染色质块状浓集、线粒体减少等超微结构改变均明显改善；睾丸组织凋亡细胞数量明显减少，细胞凋亡指数（AI）显著降低（P<0.05或P<0.01）。[结论]藏红花素能够有效抑制糖尿病大鼠睾丸组织损伤，其机制可能与其降低血糖作用有关。]]> 2019/5/14 16:46:47 22true [目的]观察白藜芦醇对脂多糖诱导的肾小管上皮细胞（HK-2）炎性损伤的保护作用，及其对TXNIP/NLRP3炎性通路的影响。[方法]采用脂多糖（LPS，1 mg/L）体外诱导HK-2细胞炎性损伤模型，将细胞分为正常对照组、LPS诱导组、LPS+低剂量（50 μmol/L）白藜芦醇组、LPS+中剂量（100 μmol/L）白藜芦醇组、LPS+高剂量（200 μmol/L）白藜芦醇组；CCK8法检测HK-2细胞相对存活率，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测炎性因子白介素-6（IL-6）、白介素-1β（IL-1β）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平，Western Blot方法分析诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、环氧酶-2（COX-2）、人硫氧还蛋白互作蛋白（TXNIP）及人隐热蛋白（NLRP3）表达。[结果]与LPS诱导组比较，不同浓度白藜芦醇干预的HK-2细胞相对存活率明显升高（P<0.05），细胞上清炎性因子IL-6、IL-1β及TNF-α水平明显降低（P<0.05），细胞中炎性蛋白iNOS及COX-2表达水平显著降低（P<0.05）；细胞中TXNIP及NLRP3蛋白表达也显著降低（P<0.05），并表现出剂量依赖性。[结论]白藜芦醇可以明显抑制LPS诱导的HK-2细胞炎症损伤，抑制炎症相关蛋白的表达，其作用机制可能与抑制TXNIP/NLRP3炎性通路活化相关。]]> 2019/5/14 16:46:47 21true [目的]观察白茶、玫瑰花及玳玳花提取物（祛斑因子A、B）对体外培养的正常人表皮黑素细胞功能及角质形成细胞和黑素细胞共培养体系中黑素小体转运的影响。[方法]制备含药血清，建立正常人表皮黑素细胞体外培养体系，采用4-甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定黑素细胞增殖，酪氨酸酶多巴速率氧化法测定酪氨酸酶活性，NaOH裂解法测定黑素生成量，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测黑素细胞酪氨酸酶mRNA的表达，Pull-down法检测黑素细胞GTP-RhoA和GTP-Rac1蛋白的表达；建立正常人角质形成细胞和黑素细胞的体外共培养体系，流式细胞术检测共培养细胞体系中黑素转运的情况。[结果]与空白血清对照组相比，祛斑因子A、B可显著抑制酪氨酸酶活性；祛斑因子A可显著降低酪氨酸酶mRNA的表达。祛斑因子A中、低剂量可抑制树突结构蛋白的表达。祛斑因子A高、中、低剂量及祛斑因子B均可抑制黑素小体的转运。[结论]为祛斑因子用于色素性疾病的保健防治提供一定的实验依据。]]> 2019/5/14 16:46:48 20true [目的]从蛋白质类泛素化修饰角度研究灵芝烯酸B（GAB）对静息期G0胃癌侧群细胞的活化作用，为胃癌侧群细胞靶向治疗提供新策略。[方法]流式细胞术分离CD133⁺的SGC-7901胃癌侧群细胞，培养细胞克隆球，给予GAB处理96 h，于不同时间点检测克隆球大小，绘制克隆球变化曲线；流式细胞术检测胃癌侧群细胞周期变化；蛋白免疫印迹（Western Blot）方法检测小泛素样修饰蛋白-1（SUMO-1）、八聚体结合转录因子4（Oct4）、细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin E1、Cyclin A2和Cyclin B1的表达水平；四甲基噻唑蓝（MTT）法检测顺铂对CD133⁺胃癌侧群细胞的半数致死量（IC50）。[结果]GAB组胃癌侧群细胞克隆球生长速度明显低于对照组；对照组CD133⁺胃癌侧群细胞主要集中于G0/G1期，而GAB组CD133⁺则主要集中于G2/M期；与对照组比较，GAB组胃癌侧群细胞的SUMO-1、Oct4和Cyclin D1蛋白表达水平降低，而Cyclin E1、Cyclin A2和Cyclin B1蛋白表达水平升高（P<0.05）；GAB处理使顺铂对胃癌侧群细胞IC50从69.84 μg/mL下降至35.67 μg/mL。[结论]GAB能够通过诱导Oct4去SUMO化激活G0期胃癌侧群细胞，增加胃癌侧群细胞对顺铂的化疗敏感性。]]> 2019/4/18 13:37:58 19true [目的]研究青蒿琥酯对过氧化氢（H₂O₂）诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用，并对其作用机制进行初探。[方法]CCK8法检测青蒿琥酯对PC12细胞相对存活率的影响，利用H₂O₂诱导PC12细胞建立氧化损伤模型，并通过CCK8法及乳酸脱氢酶（LDH）比色法分析青蒿琥酯保护PC12细胞免受H₂O₂损伤的效果，对比分析不同处理组间PC12细胞中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）含量及过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性。[结果]检测剂量范围内青蒿琥酯对PC12细胞相对存活率无明显影响（P>0.05）；与H₂O₂诱导组相比，青蒿琥酯干预组细胞相对存活率明显升高（P<0.05），LDH、SOD及MDA水平明显降低（P<0.05），PC12细胞中SOD、CAT及GSH-PX活性显著升高（P<0.05），并均表现出浓度依赖性。[结论]0.1~1.6 mmol/L浓度范围内的青蒿琥酯对PC12细胞相对存活率没有影响，可以通过减少H₂O₂产生的活性氧保护PC12细胞。]]> 2019/4/18 13:37:59 18true [目的]探讨辣椒碱对胃癌MGC-803细胞转移的诱导作用及其对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体活化的影响。[方法]采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测MGC-803细胞培养液中炎性因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平，蛋白免疫印迹（Western Blot）方法分析细胞中NLRP3炎性小体、细胞钙依粘连蛋白（E-cadherin）及波形蛋白（Vimentin）表达水平，采用Transwell法检测MGC-803细胞的迁移能力，流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）含量。[结果]辣椒碱处理MGC-803后，培养液中炎性因子IL-1β、IL-6及TNF-α释放量明显升高、NLRP3表达量增加，同时间质样标志物Vimentin的表达升高、上皮样标志物E-cadherin表达降低，但用NLRP3特异性抑制剂MCC950处理细胞之后，炎性因子表达量下调、NLRP3及Vimentin蛋白表达减低、E-cadherin表达升高，并且MCC950处理后能抑制辣椒碱增加的细胞迁移数量；ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）能逆转辣椒碱诱导结肠癌细胞NLRP3的蛋白水平及炎性因子释放。[结论]辣椒碱通过促进MGC-803细胞内ROS的表达水平来激活NLRP3炎性小体，进而促进胃癌细胞的迁移。]]> 2019/4/18 13:37:59 17true [目的]研究醒脑静注射液（XNJI）8种成分促进缺氧复氧（Hypo/Reox）星形胶质细胞对胞外高浓度谷氨酸的清除，及其条件培养液对缺氧后神经元活力的影响。[方法]体外培养大鼠星形胶质细胞，胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光鉴定。采用环磷酸腺苷（dBcAMP）和Hypo/Reox诱导胶质细胞活化并进行造模，Cell Counting Kit-8（CCK-8）测定细胞活力；谷氨酸试剂盒检测细胞培养液中谷氨酸浓度，并利用此条件培养液培养缺氧神经元，CCK-8法测神经元活力。[结果]胶质细胞体外培养成功，GFAP染色阳性。dBcAMP 0.062 5 mmol/L协同缺氧4 h复氧3 h（Hypo 4 h/Reox 3 h）处理后胶质细胞对胞外高浓度谷氨酸的清除能力显著降低。XNJI组分β-榄香烯、吉马酮、龙脑、冰片能显著提高受损胶质细胞对胞外谷氨酸的清除能力；XNJI组分吉马酮、龙脑、冰片处理的胶质细胞条件培养液能显著提高缺氧神经元的活力。[结论]XNJI组分能促进缺氧复氧胶质细胞对谷氨酸的清除并提高神经元活力。]]> 2019/3/12 11:26:45 16true [目的]促进髓样抑制性细胞（MDSCs）凋亡是抑制肿瘤生长的一个有效途径。因此，该实验旨在探究盘龙参活性成分络罗兰糖苷对MDSCs的抑制效应以及可能机制。[方法]采用MTT法分别检测洛罗兰糖苷对MDSCs细胞系（MSC-2）的毒性；采用流式分析法检测洛罗兰糖苷对MSC-2的促凋亡作用；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测洛罗兰糖苷作用后MSC-2细胞内凋亡相关基因的蛋白表达水平。[结果]细胞活性检测证实洛罗兰糖苷可以抑制MSC-2的活性；凋亡抗体染色结果显示洛罗兰糖苷可以促进MSC-2凋亡；Western Blot结果表明，洛罗兰糖苷作用下，JNK2、细胞色素C、caspase-9、caspase-3表达明显上调，而Bcl-2表达下降。[结论]洛罗兰糖苷可以通过激活Bcl-2信号通路，促进MDSCs凋亡增强免疫正调控，从而达到抗肿瘤的效果。]]> 2019/3/12 11:26:45 15true [目的]研究苦参素（OMT）对局灶性脑缺血再灌注大鼠血液流变学指标的影响并探讨其可能的作用机制。[方法]通过线栓法复制局灶性脑缺血再灌注大鼠模型，设假手术组、模型组和OMT低[25 mg/（kg·d）]、中[50 mg/（kg·d）]、高[100 mg/（kg·d）]剂量组，每组20只，术后第2天开始腹腔注射给药，疗程7 d。通过盲法神经功能评分评测神经功能损伤，测定脑组织含水量及脑组织梗死体积。通过苏木精-伊红（HE）染色观察海马CA1区神经元形态；生化分析脑组织抗氧化酶活性和丙二醛（MDA）含量；测定血液流变学指标及红细胞膜流动性指标。[结果]与模型组比较，OMT中、高剂量组神经功能评分显著降低（P<0.01）、神经功能状况明显改善，脑组织含水量显著降低、梗死体积显著减小（P<0.05或P<0.01）；海马CA1区神经元病理性形态结构改变明显改善，抗氧化酶[（超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）]活性显著升高且MDA含量显著降低（P<0.05或P<0.01）；血液流变学指标（全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数、红细胞变性指数、红细胞刚性指数、红细胞压积、血沉）显著降低（P<0.05或P<0.01），红细胞膜流动性指标（荧光偏振度、平均微黏度、各向异性）显著降低（P<0.05或P<0.01）。[结论]OMT可能通过改善血液流变学而对脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。]]> 2019/3/12 11:26:46 14true [目的]研究儿茶素没食子酸酯（EGCG）对小神经胶质细胞（BV-2）炎性损伤的保护作用，并探讨其对TLR4-MyD88-TRAF6信号通路活化的影响。[方法]采用脂多糖（LPS，1 mg/L）体外诱导BV-2细胞炎性损伤，将细胞分为正常对照组、LPS诱导组、LPS+低剂量（50 μmol/L）EGCG组、LPS+中剂量（100 μmol/L）EGCG组、LPS+高剂量（200 μmol/L）EGCG组；CCK8法检测BV-2细胞相对存活率，ELISA法检测炎性因子白介素6（IL-6）、白介素1β（IL-1β）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平，Western Blot方法分析诱生型一氧化氮合酶（iNOS）、前列腺素内氧化酶还原酶（COX-2）、Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）及TNF-α相关受体因子6（TRAF6）蛋白表达。[结果]与LPS诱导组相比，不同浓度EGCG干预的BV-2细胞相对存活率明显升高（P<0.05），细胞上清炎性因子IL-6、IL-1β及TNF-α水平明显降低（P<0.05），细胞中炎性蛋白iNOS及COX-2表达水平显著降低（P<0.05）；细胞中TLR4、MyD88及TRAF6蛋白表达也显著降低（P<0.05），并表现出剂量依赖性。[结论]EGCG能显著抑制LPS诱导的BV-2细胞炎症损伤，抑制炎症相关蛋白的表达，其可能作用机制是通过抑制TLR4-MyD88-TRAF6信号通路活化。]]> 2019/3/12 11:26:46 13true [目的]探讨香樟叶挥发油的止痒作用及其可能的作用机制。[方法]采用4-氨基吡啶诱导小鼠瘙痒模型，2，4-二硝基氟苯诱导小鼠变态反应性接触性皮炎模型，探讨香樟叶挥发油的止痒作用。[结果]4-氨基吡啶瘙痒模型中，与模型组相比，香樟叶挥发油高、低剂量10 min内舔体次数均显著减少（P<0.01），香樟叶挥发油高剂量组小鼠血清白三烯B₄（LTB₄）和5-羟色胺（5-HT）的水平显著降低（P<0.05），但香樟叶挥发油各组对白细胞介素-4（IL-4）均无显著性影响（P>0.05）。病理检查显示模型组出现大量炎细胞，香樟叶挥发油高、低剂量组未见炎细胞，挥发油低剂量组真皮层轻度增厚。2，4-二硝基氟苯变态反应性接触性皮炎模型中，与模型组相比，香樟叶挥发油高剂量组小鼠血清LTB₄的水平显著降低（P<0.05），但香樟叶挥发油各组对IL-4均无显著性影响（P>0.05）。[结论]香樟叶挥发油具有显著的止痒作用，降低瘙痒小鼠血清中5-HT和LTB₄的量是其作用机制之一。]]> 2019/3/12 11:26:46 12true [目的]基于网络药理学原理，探讨课题组前期实验有效方益气化瘀解毒方核心药对黄芪-金银花干预急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的分子通路及作用机制。[方法]应用整合药理学平台对黄芪、金银花化学成分及ARDS疾病候选靶标进行收集，根据结构相似性原理选取相似性分数≥0.8的所有药物靶标作为“黄芪-金银花”药对的潜在作用靶标，建立药物候选靶标信息数据库，通过该平台的蛋白质-蛋白质相互作用信息（PPI）数据库，获得“黄芪-金银花”药对作用的潜在靶标与ARDS疾病靶标之间的蛋白质-蛋白质相互作用信息（PPI），通过网络分析，构建“中药-核心成分-关键靶标-主要通路”的可视化网络图，进一步明确中药干预疾病的作用机制。[结果]黄芪-金银花药对共预测得到76个活性成分，其中黄芪化合物成分29个，金银花化合物成分47个。其干预ARDS作用涉及的前100个核心靶标中已知治疗ARDS的直接靶标（known disease target）78个，潜在药物靶标（putative drug target）3个，共同靶标（common target）2个；其干预ARDS的作用涉及ErbB信号通路、FoxO信号转导通路、Ras信号途径、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）-蛋白激酶B（AKT）信号通路、神经营养因子信号转导通路、细胞生长与死亡等相关生物过程和代谢通路。[结论]黄芪-金银花药对主要活性成分可针对多个靶点、多条通路发挥干预ARDS的作用，其作用与TSC1、NSDHL、GRB2、MYC、MAP2K等关键靶标及ErbB信号通路、FoxO信号转导通路、Ras信号途径、MAPK信号通路和PI3K-AKT信号通路等有关。]]> 2019/2/23 17:51:42 11true [目的]探讨槲皮素通过Wnt/β-catenin信号通路对人宫颈癌上皮细胞增殖及迁移的影响及其可能的作用机制，为抑制宫颈癌进展的临床治疗提供新的靶点。[方法]人宫颈癌上皮细胞系HeLa细胞为研究对象，给予不同浓度槲皮素处理24 h后，通过CCK-8实验检测槲皮素对HeLa细胞增殖能力的影响。采用Transwell及细胞划痕实验检测槲皮素对HeLa细胞垂直及水平运动能力的影响。免疫荧光法检测β-catenin表达及TopFlash荧光素酶报告系统检测槲皮素对HeLa细胞Wnt/β-catenin信号通路的抑制作用。[结果]CCK-8检测表明，槲皮素处理组HeLa细胞增殖率明显低于对照组（P<0.01），且抑制作用具有浓度依赖性。槲皮素处理组HeLa细胞垂直及水平运动能力均较对照细胞降低，差异有统计学意义（P<0.01）。对照组HeLa细胞中β-catenin蛋白密集分布于胞核和胞质中，而槲皮素处理组中β-catenin蛋白主要分布于细胞质中。TopFlash荧光素酶报告系统表明槲皮素处理组HeLa细胞Wnt/β-catenin信号通路受到抑制。[结论]槲皮素可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活化抑制宫颈癌细胞的增殖和迁移。]]> 2019/2/23 17:51:42 10true [目的]观察迷迭香酸对胃癌细胞（HGC27）增殖、凋亡的作用效应及对Traf6/TAK1信号通路的影响。[方法]体外培养HGC27细胞，采用低（25 μmol/L）、中（50 μmol/L）、高（100 μmol/L）剂量迷迭香酸干预，然后运用CCK8法检测HGC27细胞增殖情况，流式细胞术分析HGC27细胞周期及凋亡情况，Western Blot技术检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达及肿瘤坏死相关受体因子6/转化生长因子活化蛋白激酶1（Traf6/TAK1）信号通路活化情况。[结果]与对照组相比，不同剂量迷迭香酸能明显抑制HGC27细胞增殖、诱导其凋亡，将HGC27细胞停留在G0/G1期，差异相比有统计学意义（P<0.05）；与对照组相比，不同浓度迷迭香酸可以明显诱导Bax表达，显著抑制Bcl-2、Traf6及p-TAK1蛋白表达，差异相比有统计学意义（P<0.05）。[结论]迷迭香酸可将HGC27细胞停留在G0/G1期，抑制其增殖、诱导凋亡，其作用机制可能与抑制Traf6/TAK1信号通路活化相关。]]> 2019/2/23 17:51:42 9true [目的]研究黄连素（BBR）对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的影响及ERK-Calpain2信号通路在其中的作用。[方法]以高脂饮食喂养并注射脑垂体后叶素建立冠心病大鼠模型。大鼠分为实验组（模型大鼠）、对照组（模型大鼠）和空白组（正常大鼠），实验组大鼠予以BBR 80 mg/（kg·d）灌胃，对照组和空白组予以等量双蒸水灌胃，治疗周期为12周。采用TUNEL免疫荧光检测心肌细胞凋亡情况。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测心肌组织葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）及钙蛋白酶2（Calpain2）mRNA水平。采用蛋白质印迹法检测心肌组织GRP78、CHOP、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）、细胞外调节蛋白激酶（ERK）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase-3）、Caspase-12及Calpain2蛋白表达水平。[结果]心肌TUNEL染色后发现，与对照组比较，实验组细胞凋亡显著减少（P<0.01）。与对照组比较，实验组大鼠Caspase-12、Caspase-3、GRP78和CHOP蛋白均有不同程度下调（P<0.01），p-ERK和Calpain2蛋白表达下调，Capastatin蛋白表达升高（P<0.01）。与对照组比较，实验组大鼠GRP78、CHOP、Calpain2 mRNA表达下降（P<0.01）。[结论]BBR能抑制冠心病大鼠心肌细胞发生内质网应激凋亡，该作用可能与抑制ERK-Calpain2信号通路有关。]]> 2019/1/17 13:59:03 8true [目的]研究黄芪甲苷（AS-Ⅳ）对乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤的保护作用及机制。[方法]培养乳鼠原代心肌细胞，以缺氧4 h，复氧4 h建立心肌H/R损伤模型。四甲基噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力。检测细胞培养液中心肌肌钙蛋白（cTnT）、乳酸脱氢酶（LDH）含量，炎症细胞因子超敏C反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度。分别以聚合酶链式反应逆转录（RT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western blot）法检测心肌细胞血红素氧化酶1（HO-1）mRNA及蛋白表达水平。[结果]与H/R组比较，AS-Ⅳ、HO-1激动剂原卟啉氯化钴（CoPP）均可显著降低细胞上清中cTnT、LDH含量（P<0.01），降低炎症因子hs-CRP、TNF-α水平（P<0.01），而HO-1拮抗剂原卟啉Ⅸ锌（Ⅱ）络合物（ZnPP）作用趋势则相反。与H/R组比较，CoPP组及AS-Ⅳ组HO-1 mRNA、蛋白表达水平显著升高（P<0.01），ZnPP组则显著下降（P<0.01）。[结论]AS-Ⅳ对心肌细胞缺氧/复氧损伤具有显著的保护作用，其机制与诱导具有保护作用的HO-1表达有关。]]> 2019/1/17 13:59:03 7true [目的]探讨槲皮黄酮对原代心肌细胞肥大、线粒体功能及动力学的影响。[方法]原代培养大鼠心肌细胞，采用血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及槲皮黄酮共同干预细胞48、72 h后，BCA试剂盒检测细胞中蛋白浓度，倒置显微镜分析心肌细胞直径；酶标仪检测心肌细胞内三磷酸腺苷（ATP）及活性氧（ROS）含量，JC-1方法分析心肌细胞线粒体膜电位（MMP）；蛋白免疫印迹（Western Blot）方法测定线粒体动力学相关蛋白视神经萎缩蛋白（OPA1）、动力相关蛋白（Drp1）及磷酸化动力相关蛋白1（p-Drp1）表达量。[结果]与空白组比较，模型组心肌细胞中总蛋白浓度、细胞直径大小及ROS水平显著升高（P<0.05），ATP和MMP值则显著降低（P<0.05），Western Blot结果发现OPA1蛋白表达水平显著降低（P<0.05），p-Drp1蛋白表达水平显著升高（P<0.05）；与模型组比较，槲皮黄酮处理72 h后心肌细胞中总蛋白浓度、细胞直径大小及ROS水平显著降低（P<0.05），ATP和MMP值则显著升高（P<0.05），Western Blot结果发现OPA1蛋白表达水平显著增高（P<0.05），p-Drp1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。[结论]槲皮黄酮对AngⅡ引起的心肌细胞肥大具有保护作用，其作用机制可能与降低心肌细胞线粒体功能障碍、稳定线粒体动力学平衡相关。]]> 2019/1/17 13:59:03 6true [目的] 探讨萝卜硫素与索拉菲尼联合对肝癌HepG2细胞生长抑制及凋亡的作用，并观察其可能的机制。[方法] 细胞计数试剂盒8（CCK8）法分析了萝卜硫素、索拉菲尼及两者联合给药对HepG2细胞增殖抑制率的影响，计算每种药物的半数抑制浓度（IC₅₀）及联合时的联合指数（CI）；流式细胞仪检测了HepG2细胞凋亡情况；免疫蛋白印记（Western Blot）检测了细胞周期蛋白D1（ClinD1）、C-myc、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、磷酸化核因子-κB（p-NF-κB）及磷酸化核因子κB抑制蛋白α（p-IκBα）蛋白表达水平。[结果] 萝卜硫素与索拉菲尼联合对HepG2细胞增殖抑制作用和凋亡诱导作用显著高于各单独给药（P<0.05），还表现出浓度依赖性，呈现出明显的协同作用（CI值<1）。Western Blot结果显示，相比于对照组及单独给药组，联合给药能显著抑制原癌基因[细胞周期蛋白D1（ClinD1）和C-myc]、抗凋亡蛋白Bcl-2、p-NF-κB及磷酸化IκBα蛋白的表达，诱导促凋亡蛋白Bax的表达（P<0.05）。[结论] 萝卜硫素与索拉菲尼联合对HepG2细胞具有协同抗肿瘤作用，机制可能与诱导细胞凋亡及抑制NF-κB信号通路活化有关。]]> 2019/12/21 16:53:12 5true [目的] 探讨白花蛇舌草-半枝莲药对治疗大肠癌的物质基础和作用机制。[方法] 利用中药系统药理学分析平台（TCMSP），通过设置口服利用度（OB）≥ 30%、类药性（DL）≥ 0.18为条件并结合文献筛选出候选化合物，并通过该数据库检索与活性成分相关的作用靶点；通过比较毒物基因组学数据库（CTD）检索出大肠癌相关基因；利用Cytoscape 3.6.1构建成分-靶点网络和成分-靶点-信号通路网络；通过DAVID进行通路注释和分析，预测该药治疗大肠癌的作用机制。[结果] 与结肠癌相关的白花蛇舌草-半枝莲药对成分-靶点-信号通路网络中包含19种成分、33个靶点及25条信号通路。其度值度值前3的候选化合物分子为槲皮素、黄芩素、黄芩苷，度值前3的靶点为蛋白激酶B1（AKT1）、肿瘤抑制蛋白（TP53）、基质金属蛋白酶2（MMP-2），涉及结肠癌、P53信号通路、凋亡等25条信号通路。[结论] 白花蛇舌草-半枝莲中活性成分可作用于AKT1、TP53、MMP-2等靶点，通过调节结肠癌、P53信号通路、凋亡等多条信号通路，协同治疗大肠癌。]]> 2019/12/21 16:53:12 4true [目的]通过系统药理学相关生物信息学分析方法探讨中药材骨碎补治疗骨质疏松的的生物学通路及靶标。[方法]通过中药系统药理学分析平台（TCMSP）数据库提取骨碎补的活性成分和有关的靶标蛋白。通过运用软件Cytoscape 3.5.1构筑骨碎补有效成分与靶标关系网络进行拓扑学分析。使用STRING数据库进行蛋白之间相互作用（PPI）网络的构筑与分析。借助David数据库进行KEGG通路功能富集分析。[结果]表明骨碎补的核心化合物有柚皮苷、圣草酚、山奈酚等，重要的靶标有前列腺素G/H合成酶2（Prostaglandin G/H synthase 2）、Heat shock protein HSP 90、Caspase-3等，骨碎补发挥生物学效应作用于骨质疏松症的关键蛋白主要有JUN、TP53、MAPK1、白介素-6（IL-6）、雌激素受体1（ESR1）等。KEGG结果表明骨碎补主要作用于TNF signaling pathway、T cell receptor signaling pathway、HIF-1 signaling pathway、PI3K-Akt signaling pathway、Estrogen signaling pathway等相关信号通路。[结论]骨碎补主要通过多种途径，多种信号通路作用于多种靶点发挥抗骨质疏松的生物学效用。]]> 2019/11/13 17:53:37 3true [目的]探讨萝卜硫素对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其对Wnt/β-连锁蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路活化的影响。[方法]采用CCK8实验检测10、20、40 μmol/L萝卜硫素对SGC-7901细胞增殖的影响，流式细胞仪分析萝卜硫素对SGC-7901细胞凋亡的影响，荧光素酶报告基因实验检测萝卜硫素对Wnt/β-catenin通路中淋巴增强因子/淋巴腺黏连因子（TCF4/LEF）转录活性的影响，Western Blot方法检测萝卜硫素对SGC-7901细胞中β-catenin、糖原合成激酶3β（GSK-3β）、c-Myc及半光天冬酶3（Caspase3）蛋白表达水平的影响。[结果]与对照组相比，萝卜硫素组SGC-7901细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05），呈现出时间、剂量依赖性；萝卜硫素组SGC-7901细胞凋亡率相比对照组显著增高（P<0.05），并且萝卜硫素还能明显抑制TCF4/LEF报告质粒的荧光素酶活性（P<0.05）；萝卜硫素组SGC-7901细胞内β-catenin及c-Myc蛋白表达呈浓度依赖性降低，而GSK-3β及Caspase3蛋白表达呈浓度依赖性增高（P<0.05）。[结论]萝卜硫素能明显抑制SGC-7901细胞增殖，并诱导其凋亡，其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。]]> 2019/11/13 17:53:37 2true [目的]运用网络药理学的方法，探究当归补血汤作为化疗后辅助用药治疗肺癌的可能作用机制。[方法]通过中药系统药理学分析平台（TCMSP）数据库查询当归补血汤中的成分，并通过口服生物利用度（OB）≥30%，类药性（DL）≥0.18，筛选出活性成分，通过中药成分靶点数据库（HIT）及Swiss Target Prediction Database进行成分靶点的垂钓，通过Therapeutic Target Database（TTD）、Drugbank、DisGeNET数据库查询肺癌相关靶点，利用Cytoscape 3.2.1构建成分-靶点等多层次网络图。使用DAVID数据库对当归补血汤辅助治疗肺癌的潜在作用靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析。[结果]当归补血汤中共筛选得到27个活性成分，其中23个属于黄芪，4个属于当归，黄芪中的山奈酚、槲皮素、芒柄花素可能是辅助治疗肺癌比较重要的成分，微管相关蛋白Tau（MAPT）、细胞色素P450 19A1（CYP19A1）、雌激素受体α（ESR1）可能是当归补血汤辅助治疗肺癌比较重要的潜在作用靶点。GO富集分析显示，靶点涉及到170个生物过程相关条目、30个细胞组成相关条目、54个分子功能相关条目。KEGG通路富集分析显示，癌症通路（pathwanys in cancer）、癌症蛋白聚糖（proteoglycans in cancer）、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路（PI3K-Akt signaling pathway）等是比较重要的通路。[结论]当归补血汤中的活性成分山奈酚、槲皮素、芒柄花素可能通过作用于MAPT、CYP19A1、ESR1发挥辅助治疗肺癌的作用，为进一步研究其辅助治疗肺癌的作用机制奠定基础。]]> 2019/10/17 8:39:01 1true