心气虚证为心血管疾病的常见证型之一，临床可见心悸、气短、神疲、活动后加重、面色淡白、自汗、舌质淡和脉虚或弱等症状，是许多心血管疾病的基本病理改变基础。芪珀生脉颗粒处方来源于临床经验方，用于心气虚证的治疗，疗效显著。为验证、探讨其作用机制，课题组复制了小鼠心气虚证模型，应用超声心动图评价芪珀生脉颗粒对心气虚小鼠心功能的干预作用，为临床用药提供科学依据。

1 材料 1.1 实验动物

昆明种小鼠，SPF 级，雌雄各半，体质量20~22 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号：（SCXK 京2012-0001）。

1.2 实验药品及仪器

芪珀生脉棕褐色浸膏由本院制剂中心提供；盐酸普萘洛尔片即心得安片（批号：B150801）山西云鹏制药有限公司生产；补心气口服液（批号：150603）湖北福人金身药业有限公司；高分辨小动物超声成像系统（Vevo 770，加拿大Visual Sonics 生产）。

2 方法 2.1 小鼠心气虚证模型的建立

参照文献^[1-2]心气虚证造模方法。实验全程造模小鼠连续控食，按基础进食量（即成龄小鼠静息状态下日采食量，每只小鼠每日喂精饲料75 g/kg）进食24 d。每日在30 ℃水温的游泳缸中强迫负重（小鼠自身体质量的5%）游泳至力竭。实验20 d 后，小鼠每日灌服心得安溶液5 mL/kg（即24 mg/kg 体质量），连续4 d，造模结束。

2.2 分组与给药

昆明种小鼠96 只，雌、雄各半。雌、雄鼠分别采用随机数字表法进行分组，雌、雄鼠各分为6 组，每组8 只。模型对照组（模型组），补心气口服液阳性药对照组（阳性对照组），芪珀生脉小剂量组，芪珀生脉中剂量组，芪珀生脉大剂量组和正常对照组（正常组）。

芪珀生脉浓缩浸膏成人用量每天20 g 浸膏。根据成人临床剂量实验小鼠各组给药剂量如下：小剂量组（5 倍）1.67 g/ （kg·d）；中剂量组（10 倍）3.33 g/ （kg·d）；大剂量组（20 倍）6.67 g/（kg·d）；补心气组（10 倍）0.05 mL/（kg·d），各组小鼠于造模第11 天，负重游泳前1 h 灌胃给药，连续给药14 d，模型组、正常组灌服等剂量生理盐水。正常组小鼠实验全过程自由饮食，不负重游泳，不灌服心得安。

2.3 心功能测定

根据高分辨小动物超声成像系统的操作要求，异氟烷与氧气混合气对小鼠进行气体吸入麻醉，将4 个电极与小鼠四肢末端相连并用胶布固定，运用RMV707B 型高频超声探头对小鼠进行超声心动图检查，在取得满意的胸骨旁左心室长轴二维图像后，测量乳头肌水平左心室流出道宽度和心率；在短轴水平取得二维图像后，在乳头肌水平将M 型取样线垂直于室间隔与左心室后壁获得M 型超声心动图，测定：1）舒张末期和收缩末期左室内径（LVIDd、LVIDs）。2）舒张末期和收缩末期左室后壁厚度（LVPWd、LVPWs）。3）舒张末期和收缩末期室间隔厚度（IVSd、IVSs）。4）舒张末期和收缩末期左室容积（LVEDV、LVESV）。5）左室射血分数（EF）、左室短轴缩短率（FS）、每搏排血量（SV）、心率（HR）等由软件自动计算得出，每组原始数据取连续3 个心动周期的平均值^[3-4]。

2.4 统计学分析

数据采用SPSS18.0 软件统计分析，实验结果以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，以P＜0.05 表示差异具有统计学意义。由于雌、雄鼠生理指标差异较大，分别统计。

3 结果

结果表明，与正常对照组相比，心气虚模型组小鼠LVIDs、LVESV 明显增加（P＜0.01），LVPWs、IVSs 减小（P＜0.01），EF、FS、SV、HR 明显降低（P＜0.01），提示心气虚造模使小鼠心率下降，左心室收缩末期的结构明显变化，左室收缩功能减退，心脏泵血机能明显下降，符合临床心气虚证心功能改变特征^[5]，与文献报道心气虚证动物模型结果一致^[6-7]。

与模型组相比，雌、雄性小鼠芪珀生脉大剂量组超声心动图各指标均有显著改善，结构方面，可对抗心气虚小鼠LVIDs 和LVESV 的扩张（P＜0.05），可抑制IVSs 变薄（P＜ 0.01），其中雄性小鼠大剂量组还可抑制LVPWs 变薄（P＜0.01）；收缩功能方面，雌、雄性小鼠芪珀生脉大剂量组可升高心气虚小鼠EF、FS、SV（P＜ 0.05，P＜0.01），改善左心泵血功能。雌、雄性小鼠芪珀生脉中剂量组也可明显提高心气虚小鼠EF、FS（P＜0.05），但对心气虚小鼠左心室结构方面影响较小。同时，阳性对照药补心气口服液组也可从左心室结构和功能方面提高心气虚小鼠心功能，与模型组比较差异显著（P＜0.05，P＜0.01）。结果见表 1、表 2。

4 讨论

心血管疾病是全球范围内造成死亡的最主要原因，患病率持续上升，中国心血管病患者已达2.9 亿，成为中国所有疾病发病率和病死率的第一位。在心系疾病中，心气虚证为常见证型^[8-9]，因此，对心气虚证研究是中医防治心血管疾病的关键。近年研究认为心功能不全与心气虚证密切相关^[10-12]，王硕仁^[13]将103 例冠心病患者分为心气虚血瘀证与非心气虚血瘀证两组，多普勒超声心动图检测发现心气虚证表现出左室舒张和收缩功能的减弱，研究结果表明，左室收缩功能评价对心气虚诊断有高特异性（88％），因此心功能异常可作为诊断心气虚证的重要依据。

从实验结果可以看出，经过复合因素造模24 d，雌雄小鼠体质量明显下降，雄鼠正常组体质量（39.96±3.62）g，模型组（17.65±0.91）g；雌鼠正常组体质量（27.30±2.91）g，模型组（14.81±0.78）g，由数据可知雌雄小鼠模型组体质量与正常组差异非常显著（P＜0.01）。模型组小鼠可见精神萎靡、形体瘦弱、毛发枯槁、鼻尾颜色淡青等心气虚症状；反映心脏收缩功能的指标均呈现明显降低的趋势，表明心脏的收缩功能受到抑制，提示复合因素造模可明显降低小鼠的心功能，心功能损伤可能是造成心气虚证的重要机制。

芪珀生脉颗粒以黄芪、北沙参、琥珀等药组方，治疗心气虚之心悸，气短，乏力临床疗效显著。本实验结果，由于雌、雄鼠体质量差异较大，雌性小鼠更加瘦弱，可见心脏超声中心脏结构相关指标如IVSs、LVPWs、LVIDs 和LVESV，雌鼠数值偏低，心脏SV 也较雄鼠偏小，因此实验数据雌、雄小鼠分别统计。结果表明，不论雌、雄鼠，芪珀生脉大、中剂量组均可升高心气虚小鼠EF、FS，改善左心泵血功能，大剂量组还可提高心脏SV；心脏结构方面，不论雌、雄鼠，芪珀生脉大剂量组可对抗心气虚小鼠LVIDs 和LVESV，可抑制IVSs 变薄，雄鼠大剂量组还可抑制VPWs 变薄，说明芪珀生脉颗粒可以抑制心气虚证引起的心室结构的改变，对心肌有良好的保护作用。HR 方面，实验各组雌性小鼠心率均高于雄鼠，应与体质量，心气虚程度，麻药吸入量等有关。此外，本课题组研究发现芪珀生脉颗粒还可降低心气虚小鼠心肌超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量，降低血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量，研究结果另文发表，因此推测芪珀生脉颗粒抗炎、抗氧化作用是其保护心肌，改善心气虚证小鼠心功能的可能机制。