丹红注射液主要含有从丹参、红花提取的有效化学成分，临床常用于防治心脑血管疾病^{[1, 2, 3]}，比如冠心病、心绞痛、心肌梗死，缺血性脑病、脑血栓等。参麦注射液主要含有从人参、麦门冬、五味子提取的有效化学成分，临床上对于冠心病的防治应用广泛，现代研究表明其具有强心，调节血压，改善脑、肺、肾、消化系统功能，提高机体免疫力，对恶性肿瘤的化疗有增效、减毒等作用^{[4, 5]}。参附注射液主要含有从红参和附片提取的有效化学成分，研究表明其能改善脑缺血以及抗自由基氧化神经元的作用^{[6, 7]}。有研究表明，丹红、参麦、参附3种注射液均具有抗氧化活性^{[8, 9, 10]}并对心脑血管疾病均有防治作用。本实验通过1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除法、铁离子还原法、总抗氧化能力检测法测定了3种注射液的抗氧化能力强弱。

丹红注射液（菏泽步长制药有限公司，批号14041001），参麦注射液（正大青春宝药业有限公司，批号1402244），参附注射液（雅安三九药业有限公司，批号14061001），抗坏血酸（天津市北方医学化学试剂厂，批号20120207），DPPH（Sigma公司，批号STBB0827V），铁氰化钾[K3Fe（CN）6，天津市赢达稀贵化学试剂厂，批号20130318]，三氯乙酸（天津市福晨化学试剂厂，批号20150320），氯化铁（天津市赢达稀贵化学试剂厂，批号20140929），总抗氧化试剂盒（天津市赢达稀贵化学试剂厂，批号S0119）。

分析天平（Mettle Toledo公司），酶标仪（Molecular Devices公司）。

将不同浓度的样品溶液100 μL加入到96孔板中，再向其中加入100 μL 0.16 g/L的DPPH甲醇溶液，混匀。丹红、参麦及参附3种注射液均具有颜色，为了消除颜色对该体系的影响，将100 μL甲醇与100 μL不同浓度的样本溶液混匀，作为空白对照；再将100 μL甲醇与100 μL DPPH溶液混匀，作为阴性对照。在37 ℃条件下，反应50 min，测定517 nm波长的OD值。

还原力的测定，实质上是检验物质是否为良好的电子供应者的过程。还原能力比较强的物质供应的电子除可以还原氧化性物质外，也可与自由基发生反应，使自由基成为稳定的物质。

K₃Fe（CN）₆+样品→K₄Fe（CN）₆+样品氧化物
K₄Fe（CN）₆+Fe₃+→Fe₄[Fe（CN）₆]₃

精密称取PBS，GAE标准品1 mg，用甲醇配成一系列浓度的标准品溶液，分别取等量标准品溶液加入磷酸盐缓冲溶液（PBS，pH 7.2）和铁氰化钾（1%，W/V），于50℃下混匀，水浴20 min。加入三氯乙酸（10%，W/V）后，取上清液用水稀释1倍，加入氯化铁溶液（0.1%，W/V），静置30 min后，在700 nm波长下测量吸光度，以甲醇溶液代替GAE作为空白溶液，每份样品平行操作3次。以GAE的浓度（X）为横坐标，吸光度（Y）为纵坐标，绘制GAE的标准曲线$\hat Y$=0.004 9X+0.084 4（r²=0.994 9）。

分别取等量丹红、参麦、参附3种注射液于EP管中，按照“2.2.1" 项操作步骤进行实验，利用回归方程求出供试品溶液中折合GAE的浓度，即GAE当量。空白组用超纯水代替氯化铁溶液（0.1%，X/V）。

总抗氧化能力检测试剂盒，即Total Antioxidant Capacity Assay Kit，简称T-AOC Assay Kit，是一种采用2，2'-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）作为显色剂，可以对各种抗氧化物（antioxidant）溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。

精密吸取Trolox标准品溶液，分别配制成1.5、1.2、0.9、0.6、0.3、0.15 mmol/L的溶液。在96孔板的每个检测孔中，加入200 μL ABTS工作液，再加入10 μL各种浓度的Trolox标准溶液，轻轻混匀。6 min后，在734 nm波长下测量吸光度，以Trolox的浓度（X）为横坐标，吸光度（Y）为纵坐标，绘制Trolox标准曲线。$\hat Y$=-0.731 7X+1.137 1（r²=0.999 0）。

96孔板每个检测孔中加入200 μL ABTS工作液。空白对照孔中加入10 μL PBS溶液，样品检测孔内加入10 μL各种样品，轻轻混匀。6 min后，在734 nm波长下测量吸光度。

使用SPSS18.0统计软件，所有实验数据使用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。

通过DPPH自由基清除法，以半抑制浓度（IC50）值为指标，测定丹红、参麦、参附3种注射液的抗氧化活性。实验结果表明，丹红、参麦、参附3种注射液均具有较好的抗氧化活性，其中以丹红的抗氧化活性为最好，参麦注射液介于丹红与参附注射液之间。见图1。

图1 丹红、参麦、参附3 种注射液IC50的比较 Fig.1 Comparison of IC50 of Danhong, Shenmai and Shenfu injections

图选项

通过测定3种注射液对铁离子的还原能力，得知丹红、参麦及参附3种注射液均具有良好的铁离子还原能力，其还原能力测定顺序为丹红注射液>参麦注射液>参附注射液。见图2。

图2 丹红、参麦、参附3 种注射液GAE当量比较 Fig.2 Comparison of the GAE of Danhong, Shenmai and Shenfu injections

图选项

通过总抗氧化能力试剂盒法，测定3种注射液的抗氧化能力，实验结果表明丹红、参麦、参附3种注射液均具有抗氧化能力，其抗氧化能力强弱顺序为丹红注射液>参麦注射液>参附注射液。见图3。

图3 丹红、参麦、参附3 种注射液抗氧化能力比较 Fig.3 Comparison of antioxidant activities of Danhong, Shenmai and Shenfu injections

图选项

近些年来，大量研究表明氧化应激是导致心血管系统结构、功能异常的重要原因之一^[11]，因此研究抗氧化的病生理机制及防治是关键。氧化应激是细胞内抗氧化防御系统受损或氧自由基生成过多，进而氧自由基使机体组织与细胞受到损害的一种反应。氧化应激与各种病理生理机制相互作用，共同促进心血管疾病的发生、发展^[12]。因此，抗氧化治疗能有效地保护、改善心肌和血管的结构和功能，为临床治疗心血管疾病开辟了新的思路和方法。研究证实，寻找天然、安全的生物抗氧化剂逐渐成为研究热点^{[13, 14]}。中国中药资源极其丰富，是天然抗氧化剂的重要来源，并且中草药的抗氧化性已经引起了充分的重视^{[15, 16]}。本实验中，采用DPPH自由基清除能力测定法、铁离子还原能力法、总抗氧化能力试剂盒法3种方法，测定丹红、参麦和参附3种注射液抗氧化能力的强弱，其中以丹红注射液的抗氧化活性最好，参麦注射液居于丹红注射液与参附注射液之间，抗氧化能力强弱顺序为丹红注射液>参麦注射液>参附注射液。