奥沙利铂是结直肠癌化疗的一线药物，然而却会导致患者出现严重的急性和慢性周围神经病变，并且常常呈现神经病理性疼痛^{[1, 2]}。患者经历多个疗程的治疗后，表现出周围神经慢性病变，其主要临床症状特点是上下肢端麻木感和感觉迟钝，甚至可有患者出现运动功能障碍。慢性神经病变是临床奥沙利铂化疗的剂量限制性毒性，往往导致化疗的中断，严重影响患者生存质量^{[3, 4]}。中医肿瘤学者研究认为化疗所致神经病理痛归属“血痹”和“痹证”范畴^{[5, 6]}。气虚血瘀是本病发生发展基本病理基础，应以益气活血为基本治则^{[7, 8, 9]}。补阳还五汤若论治法，补气为主，活血通络为辅^{[10, 11]}。本实验通过建立奥沙利铂致大鼠慢性神经病理痛模型，选择补阳还五汤为代表方揭示其对奥沙利铂致神经病理痛的干预作用，研究结果将为防治奥沙利铂化疗致神经病理痛提供新思路。

将黄芪120 g，当归6 g，赤芍4.5 g，川芎3 g，地龙3 g，红花3 g，桃仁3 g等7味药浸入10倍体积双蒸水浸泡2 h，常规制成浓度为6 250 g/L的溶液；高压灭菌后，4 ℃保存，用前摇匀(由天津人民医院中药房制备提供)。

选取健康清洁级雄性Wistar大鼠，体质量180~230 g。实验期间保持自由饮水和进食，饲养环境温度为(22±2) ℃，适应性喂养1周后进行实验，采用随机数字表法随机分组，每组15只大鼠。空白对照组：灌胃给予等量生理盐水。奥沙利铂组：给予奥沙利铂4 mg/(kg·d)，每周2次腹腔注射，持续4周。在造模前1天用电子天平称量体质量，实验过程每周2次测量并记录，根据体质量调整奥沙利铂的剂量。补阳还五汤对照组：灌胃给予补阳还五汤水煎剂浓缩液50 g/(kg·d)(参照临床等效剂量的4倍剂量给药)，每日2次，连续灌胃28 d。补阳还五汤治疗组：给予奥沙利铂方法同前，同时灌胃补阳还五汤水煎剂50 g/(kg·d)。

建立奥沙利铂化疗所致慢性神经病理痛大鼠模型，通过行为学实验评价补阳还五汤干预作用。行为学测试均于给药完毕后1 h，在上午9∶00~11∶00之间进行；给药人员不参与行为学测试。每次测试前大鼠有30 min适应测试环境和测试者。观测时间持续至第1次给药后4周。

按照已有研究方法进行实验，分别于给药前和给药后第7、14、21、28天，将大鼠置于有机玻璃箱内3 mm厚的玻璃板上，适应环境 15 min。按仪器操作说明进行测试，用热刺激仪刺激大鼠后肢足底中部皮肤，同时开始计时，出现抬足、舔足，逃避等反应时读刺激仪上的时间^[12]。照射光源强度适度调整，控制正常大鼠潜伏期介于10~20 s之间；设置自动切断时间为30 s，防止烧伤大鼠皮肤。大鼠双足分别连续测量5次，每次间隔 5 min，去除极端值后计算3次平均值，即为大鼠的热辐射痛阈值^[12]。

各组体质量和热痛阈值用均数±标准差(±s)表示，数据用SPSS19.0 软件包进行统计学处理，多组间比较采用重复测量的多因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

大鼠给予奥沙利铂后，模型组大鼠逐渐出现行动迟缓，进水进食显著减少；除空白对照组外，其余各组均有3只动物死亡，补阳还五汤对照组为灌胃失误致死；其他两组均为不适应化疗所致。重复测量的多因素方差分析结果显示，大鼠体质量随时间进程差异显著(F=51.659，P<0.001)；分组和各测量时间点间存在交互作用(F=3.516，P<0.01)，提示时间因素的作用随分组的不同差异显著。经LSD检测后发现，空白对照组与第1周相比，第3周和第4周动物体质量显著增加(P<0.05)。补阳还五汤对照组，第3周和第4周动物体质量显著增加(P<0.05)。奥沙利铂组4周内体质量比较无统计学差异；补阳还五汤治疗组第2周体质量不增加，反而减少，提示化疗药物的不良反应，影响动物进食；后2周体质量又显著增加，提示补阳还五汤的干预作用。结果见表1，图1。

表1 补阳还五汤对大鼠体质量的影响（±s） Tab.1 Effects of Buyang Huanwu decoction on rat body weight(±s)

g
组别	第1 周	第2 周	第3 周	第4 周
空白对照组	270.66±13.90	269.55±5.85	310.78±7.85*	315.01±9.83**
奥沙利铂组	272.97±7.24	268.19±8.01	292.49±10.72	283.91±9.02
补阳还五汤对照组	274.83±6.36	274.88±8.49	310.17±9.43*	304.47±14.41*
补阳还五汤治疗组	277.82±5.33	263.81±8.05	302.48±8.55*##	300.50±6.18*##
注：与第1周相比，*P<0.05；与第2 周相比，**P<0.01；与第2 周相比，##P<0.01。

表选项

图1 不同组大鼠4 周内体质量变化趋势图 Fig.1 The trend of body weight changes in different groups of rats within four weeks

图选项

对照组热痛阈值随时间呈降低趋势(见表2，图2)。经重复测量的多因素方差分析发现，热痛阈值基础值、第1周至4周时间点间差异显著(F=21.257，P<0.001)。第2周热痛阈值4组间差异无统计学意义，两两比较显示，与模型组相比补阳还五汤对照组热痛阈值有统计学差异，补阳还五汤治疗组热痛阈值与模型组相比有统计学差异。重复测量的多因素方差分析发现，分组和各测量时间点间无交互作用(P<0.297)。

表2 补阳还五汤对神经病理痛模型大鼠热痛阈值的影响(±s) Tab.2 Effects of Buyang Huanwu decoction on thermal pain threshold of the neuropathy pain rat model(±s)

s
组别	基础值	第1 周	第2 周	第3 周	第4 周
空白对照组	16.02±1.76	14.70±1.23	14.33±1.44	11.41±0.94	9.87±0.59
奥沙利铂组	16.14±0.59	18.49±1.58	17.20±1.60	12.68±0.93	11.59±0.85
补阳还五汤对照组	16.27±1.02	15.43±1.38	11.08±1.51**	9.84±0.87*	10.49±1.27
补阳还五汤治疗组	16.09±1.24	18.25±1.73	11.95±1.23*	10.22±1.06	10.57±0.80
注：与奥沙利铂组相比，*P<0.05；与奥沙利铂组相比，**P<0.01。

表选项

图2 不同组大鼠热痛阈值变化趋势 Fig.2 The trend of heat pain threshold in different groups of rats within four weeks

图选项

奥沙利铂致神经病理痛是在化疗中常见的毒副反应，患者肢体常常发生疼痛、麻木等不能耐受的症状往往中断化疗。奥沙利铂化疗致慢性神经病理痛机制未完全清楚，是非常棘手的临床问题^{[13, 14]}。补阳还五汤是清代名医王清任在《医林改错》中最早呈现，由黄芪、当归、赤芍、川芎、红花、地龙组成，该方临床常用于治疗如缺血性脑中风、中风后遗症等疾病^{[15, 16]}。随着该方研究深入，临床证实补阳还五汤可用于治疗奥沙利铂所致神经病理痛^{[17, 18]}。方中重用黄芪，补益元气，意在气旺则血行，瘀祛则络通，为君药；大剂量黄芪以求其大补元气、推动血液运行为君药，强调了中医学中“气为血帅”和“气行则血行”的理论^[19]。诸药合用，益气补血与活血行血，使气旺血行、补而不滞，解毒散结、活血化瘀而不伤正气，从而使气行血行。血痹的病因包括气血不足之体，外受风寒，阳气不能充于脉，血不能荣于脉，治疗当使阳气畅行于脉中，血运亦能趋于稳态，筋脉自荣^[20]。

本研究结果表明，给予大鼠奥沙利铂后，动物明显出现行动迟缓，进水进食显著减少现象，致使动物体质量减少，提示补阳还五汤可发挥一定的干预作用。补阳还五汤可拮抗奥沙利铂化疗大鼠引起的热痛阈值的变化。目前奥沙利铂神经毒性的机制尚不明确，并且也不清楚补阳还五汤通过怎样的机制发挥作用，因此尚需进一步的实验研究以明确奥沙利铂致神经病理痛的发病机制以及补阳还五汤的干预机制，后续研究应该进一步从分子机制方面进行研究，以便更好地指导临床用药，减轻肿瘤患者的痛苦。