涂膜剂是指药材经适宜溶剂和方法提取或溶解，与成膜材料制成的供外用涂抹，能形成薄膜的液体制剂^[1-2]。本院中药协定处方“洗眼一号”是以大黄、黄连、黄芩、黄柏，用自动煎药包装机水煎制得的汤剂,为苦寒之品，可以清热，治疗热毒实症引起的外障眼病^[3]。其君药为大黄，主药有效成分为大黄酸、大黄素、大黄酚等^[4]。以往的治疗是取适量药液浸湿纱布进行局部湿敷，用药前需对患者进行讲解和指导，又因过程的繁琐使患者依从性差。本课题欲将这4 味中药进行适当的提取^[5]与成膜材料聚乙烯醇（PVA）制成涂膜剂，增强治疗效果，简化用药程序，增加患者的依从性。本研究利用正交实验法优化中药“洗眼一号”涂膜剂制备工艺的各种因素，建立最佳制备工艺。并且确定其安全性。

1 材料与实验方法 1.1 仪器

DA 系列温度显示调节仪8002 型恒温水浴箱（余姚市长江温度仪表厂）；Model C3860A 型超声仪（CBL photoelectron technology）；HC·TP12A·1架盘药物天平（北京医用天平厂）；BZY150R型自动煎药包装机（天津三延精密机械有限公司）；醇度计等。

1.2 试剂及药物

乙醇（天津中瑞药业有限公司，批为141001）；丙酮（天津市化学试剂批发公司，批号为20140121）；PVA；天津市眼科医科院中药“洗眼一号”中的饮片及冰片来自于天津市中药饮片厂。

2 实验方法 2.1 浸膏的制备过程 2.1.1 中药“洗眼一号”药液的制备

首先，取10 剂“洗眼一号”，饮片总计400 g，使用自动煎药包装机进行煎煮。然后，加入水4 800 mL，浸泡20 min，然后将其煎煮90 min，最后制得的药液总计3 600 mL左右，每付约合360 mL。

2.1.2 浸膏的制备

将药液提取物用旋转蒸发仪浓缩，得到浸膏115 g。根据《中华人民共和国药典》的规定，1 g浸膏应合原材料2~5 g，本实验所制备的浸膏合原材料3.48 g，符合药典的规定^[6]。

2.2 空白膜的制备过程

将一定量的PVA 置于烧杯中，加入适量85%浓度的乙醇，浸泡过夜。第2天将浸泡好的PVA进行过滤，压干，反复2 次，放置于阴凉处自然干燥，备用。取PVA置于烧杯中，然后将蒸馏水加入到烧杯中，在85℃水浴的条件下使其慢慢溶解，再缓慢滴加95%乙醇，边加边搅拌，待搅拌均匀后再缓慢加入丙酮，边加边搅拌，最后向烧杯中加入冰片适量，如果发现其中有气泡存在，则进行超声脱气，自然冷却即得。

2.3 中药“洗眼一号”涂膜剂的制备过程

将适量的PVA置于1 号烧杯中，在85℃水浴加热的条件下将其溶于蒸馏水。然后将适量浸膏置于2号烧杯中，加入一定量蒸馏水，用玻璃棒将其搅拌均匀，使药物能完全溶解于蒸馏水中。之后再将溶解完全的药液倒入1 号烧杯中，与PVA均匀混合。然后缓慢滴加95%乙醇，边加边搅拌，待搅拌完全后再缓慢加入丙酮，边加边搅拌，之后再加入氮酮和冰片适量，如果发现其中有气泡存在，则进行超声脱气，自然冷却即得。

2.4 单因素考察 2.4.1 PVA 种类的影响

药用的PVA 分子量在30 000~200 000，平均聚合度为500~5 000，市场有高黏度、中黏度和低黏度的不同产品^[7]。本实验起初选用的PVA 甲，虽然在水中的溶解性比较好，但是由于其成膜时间较长，故舍弃。之后更换了PVA 的种类，将聚合度小的PVA甲换为PVA聚合度较高的乙，虽然其水溶性不好，但在85℃水浴中也是可以溶解的，最后选用PVA乙作为本实验的成膜材料。

2.4.2 PVA 用量的选择

经过多次试验，将PVA的用量确定为1 g，1 g PVA 的用量正好可以供患者双眼使用一次。

2.4.3 95%乙醇用量的影响

95%乙醇的用量与涂膜剂的成膜时间有很大关系，95%乙醇用量较多时，成膜时间较短，但是过多时，反而使成膜时间延长，在基本处方的其它成分不变的情况下，将95%乙醇的用量设1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 mL 按涂膜剂的制备方法进行实验，结果表明95%乙醇用量为1~3mL时，涂膜剂的成膜时间较短。

2.4.4 丙酮用量的影响

丙酮在该涂膜剂中的作用是增加膜的塑性，在基本处方的其他成分不变的情况下，丙酮的用量设1、2、3、4、5、6 mL 按涂膜剂的制备方法进行实验，发现丙酮的用量为1~2 mL时，所成膜的塑性是最适宜的。

2.4.5 蒸馏水用量的影响

蒸馏水作为该实验的溶剂，如果加入过多就会使该涂膜剂的成膜时间太长。如果加入过少又会使浸膏和PVA 不能完全溶解，在基本处方的其他成分不变的情况下，将水的用量设5、10、15、20 mL 按涂膜剂的制备方法进行试验，发现蒸馏水用量为5~10 mL时，效果较好。

2.4.6 浸膏用量的影响

浸膏作为该实验处方中的主药，经过多次实验，发现浸膏用量为1~1.5 g时，溶解的效果最好。

2.4.7 冰片的影响

冰片作为透皮吸收促进剂，用量较小，对此涂膜剂的质量控制和综合评分没有太大的影响，故暂不把冰片作为考察的因素。

2.5 涂膜剂性能的评分指标

涂膜剂评分的考察可以从两方面来考察，一是涂膜剂的成膜时间；二是涂膜剂的外观性状。两个因素的考察各占评分的50%，涂膜剂性能的综合得分=（15-成膜时间）×50%+外观形状×50%^[8-10]。

2.5.1 成膜时间的考察

将涂膜剂均匀涂于皮肤表层，观察其成膜的时间，当成膜时间大于15 min时，成膜时间的得分为0。

2.5.2 外观性状的考察

将涂膜剂均匀涂于皮肤表层，观察其外观性状，可以根据涂膜剂的柔韧性、均匀性及流动性3 个方面来进行考察。每个指标的分值为1~3分，效果好的为3分，效果一般的为2分，效果稍差的为1分。

2.6 正交实验设计及结果

根据单因素考察的结果，本实验对浸膏用量、95%乙醇用量、丙酮用量、蒸馏水用量这4 种因素进行了优选，为了进一步筛选出涂膜剂的最佳处方，选用L₉（3⁴）正交实验表，因素与水平见表 1，正交实验安排与结果分析见表 2，方差分析结果见表 3。按表 1中的因素与水平进行涂膜剂制备的实验，实验共计9 次，将每次实验的结果按照涂膜剂性能的评分指标进行评分，实验结果见表 2，然后对表 2进行数据处理，得到表 3。根据两个表格中的数据可以得知，D 因素具有显著性意义，对本实验的影响最大。最终得到中药“洗眼一号”涂膜剂优选的制备工艺为A₁B₁C₁D₁，即浸膏1g，95%乙醇2 mL，丙酮1 mL，蒸馏水5 mL。

2.7 验证实验

分别取蒸馏水、95%乙醇、PVA 乙、丙酮、浸膏各5 份，按照正交实验优选出的制备工艺A1B1C1D1 进行验证实验，5 份成品的综合得分依次为8.5、8.5、8、8.5、9，结果均较为理想。表明该正交试验设计的结果可靠。

3 涂膜剂的安全性考察—皮肤刺激性实验 3.1 实验方法

健康无伤家兔8 只（北京科宇动物养殖中心提供，实验动物合格证号No.11401400000508，动物实验单位：天津市医药科学研究所），雌雄各半，体质量范围2.2~2.5 kg，随机分为破损皮肤组和完整皮肤组，试验前24 h在兔背部的脊柱两侧剪剃10 cm×15 cm区域兔毛，作为实验和观察部位。实验相当于脊柱两侧各选择2 个区域，用手术刀在破损皮肤组家兔的背部脊柱两侧皮肤各轻轻划1 个“井”字，大小2 cm×2 cm，以渗血为度。将0.5 mL样品直接涂布在破损皮肤的“井”字划痕上，左侧为样品区涂布涂膜剂样品，右侧为对照区涂布阴性对照液（0.9%氯化钠注射液）。用两层纱布覆盖涂布品，上面再用一层纱布覆盖. 用胶布固定4 h后除去检品，在给药24 h和48 h后重复以上给药过程，每次检品都与“井”字划痕处皮肤接触4 h。完整皮肤组背部不划“井”字外，操作同破损皮肤组^[11]。

3.2 观察结果

除去敷贴物后24、48、72h，观察敷贴部位皮肤组织反应。完整皮肤组和破损皮肤组在观察期限内的各个时间点，皮肤刺激程度分值均为0，样品对破损皮肤和完整皮肤均无刺激性。