炒神曲，始载于《药性论》，是由苦杏仁、赤小豆、青蒿、苍耳子、辣蓼按照一定比例混匀后加入面粉（或与麦麸混合）发酵炮制而成的曲剂，具有健脾消食、理气化湿的功效，临床主要用于治疗饮食停滞，消化不良，脘腹胀满，食欲不振，呕吐泻痢^[1-4]。

神曲药效物质基础不清楚，作用机制不明确，质量标准研究未反映神曲作为发酵中药的特点。文献报道的神曲的质量研究多局限于青蒿、苦杏仁等药味中某些成分的测定^[5]，以及神曲中消化酶、蛋白酶等活性测定研究^[6-7]。神曲作为一种发酵中药，在发酵过程中能够产生厌氧代谢产物，可以作为进一步质量评价的指标，但目前未见此方面的文献报道。短链脂肪酸是微生物厌氧发酵的产物，能为结肠提供能量，调节肠道pH值^[8]，抑制结肠炎症反应^[9-12]，肿瘤细胞增殖、原癌基因表达；促进抑制肿瘤细胞的分化和凋亡^[13-16]。因此，本研究对神曲中短链脂肪酸进行分析研究，为进一步的质量评价奠定基础。

本研究采用顶空气相色谱-质谱联用法（HS-GC/MS）对炒神曲中短链脂肪酸进行分析，将炒神曲样品置于顶空进样瓶中，无需前处理，本方法简单，灵敏度高，可作为快速分析炒神曲中短链脂肪酸的方法。

1 仪器与试药 1.1 仪器

GC450-MS320气相色谱-质谱联用仪，配置CTC顶空进样器，Varian MS Workstation 6.92工作站（美国Varian公司）；XS205万分之一电子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；AL204千分之一电子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；FW-100高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。

1.2 试药

中药炒神曲购自北京同仁堂药店天津河西分店。

2 方法与结果 2.1 供试品制备

取炒神曲粉末2 g，精密称定，置于顶空进样瓶中，即得。

2.2 分析条件

顶空进样条件：顶空振荡室加热温度：80 ℃；加热时间：30 min；加热方式：振荡加热；顶空进样针温度：80 ℃；进样量：1.0 mL；不分流模式^[17]。

GC条件：色谱柱：DB-FFAP色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；升温程序：初始50 ℃保持1 min，以10 ℃/min升至200 ℃；进样口温度：250 ℃；载气：高纯氦气（纯度＞99.999 %）；流速：1.0 mL/min。

MS条件：电离方式：EI；电子能量：-70 eV；离子源温度：250 ℃；传输线温度：280 ℃；电子倍增器电压：0.95 kV；全扫描模式，扫描范围m/z 33~200。

2.3 数据处理

通过检索美国国家标准与技术研究院（NIST）标准质谱库，得到化合物信息，统计R和F匹配度（R匹配为样品谱图与标准谱库检索得到结果的相似度；F匹配为标准品库逆向检索得到结果与样品谱图的相似度）均大于700的挥发性成分^[17]。

3 结果与讨论 3.1 分析方法的选择

短链脂肪酸无紫外吸收与荧光基团、极性大，难以采用高效液相色谱-紫外法检测；由于其具有强挥发性，文献报道多采用气相色谱法（GC）进行分析，但是多采用衍生化处理，过程繁琐费时，溶剂毒性大，重复性较差^[18]。本研究采用顶空气相色谱-质谱联用法进行分析，无需对样品进行处理，操作简单，灵敏度高，可作为快速检测炒神曲中短链脂肪酸的方法。

3.2 炒神曲中短链脂肪酸HS-GC/MS分析

采用已构建的HS-GC/MS方法分析，得到炒神曲的HS-GC/MS色谱图，见图 1。通过检索NIST标准质谱库，在炒神曲中共检测到7种短链脂肪酸：乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸。测定结果见表 1。

在此基础上，进一步推测其裂解途径，验证NIST标准质谱库的化合物检索结果。如图 2所示，以戊酸为例，戊酸易发生麦氏重排，形成较强的m/z 60的碎片峰；羰基易发生烯醇式互变，然后发生β-裂解，产生m/z 73的碎片；羰基发生烯醇式互变，进一步发生麦氏重排，然后脱去一分子H₂O后，发生i -裂解，产生m/z 41的碎片峰。

4 结论

本研究采用HS-GC/MS鉴定了中药神曲中7种短链脂肪酸，为神曲的质量研究奠定基础。