天津中医药  2018, Vol. 35 Issue (11): 874-876

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陈林伟, 王琴, 彭德熹, 袁成业, 蔡宝昌, 王翼, 王姝梅
CHEN Linwei, WANG Qin, PENG Dexi, YUAN Chengye, CAI Baochang, WANG Yi, WANG Shumei
基于GC-MS的气血双补酒挥发性化学成分研究
Study on volatile chemical constituents of Qixue Shuangbu Tinctura based on GC-MS
天津中医药, 2018, 35(11): 874-876
Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 35(11): 874-876
http://dx.doi.org/10.11656/j.issn.1672-1519.2018.11.19

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收稿日期: 2018-07-11
基于GC-MS的气血双补酒挥发性化学成分研究
陈林伟1 , 王琴1 , 彭德熹1 , 袁成业1 , 蔡宝昌2 , 王翼3 , 王姝梅1     
1. 南京中医药大学泰州附属医院, 泰州 225300;
2. 南京中医药大学, 南京 210023;
3. 南京理工大学泰州科技学院, 泰州 225300
摘要:[目的]采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析研究气血双补酒中的挥发性化学成分。[方法]通过水蒸气蒸馏的方法提取出气血双补酒中的挥发性化学成分,同时采用GC-MS技术对挥发油提取物进行挥发性化学成分分析研究,利用谱库检索结合药材色谱峰归属对气血双补酒挥发油进行定性分析,应用峰面积百分比法计算相对量。[结果]从气血双补酒挥发油中共鉴定出39个主要挥发性成分,其中异鲸脑酸(10.24%)相对量最高,并对各色谱峰进行药材归属,39个色谱峰全部归属至药材。[结论]通过GC-MS能够快速有效分析气血双补酒中的挥发性成分,为气血双补酒药效物质基础的研究和质量控制提供参考。
关键词气血双补酒    GC-MS    挥发油    成分鉴定    

气血双补酒是江苏省中医院名老中医孟景春教授的临床经验方,是由人参、黄芪、当归、炒白芍、陈皮、玉竹、酒黄精、制何首乌、枸杞子9味中药组成的复方制剂,具有补益气血、通阳散结、复脉固脱等功效,临床上常用于治疗心力衰竭、心肌缺血、冠心病、心绞痛、免疫力低下以及恶性肿瘤等疾病[1-2]。国内外已有相关文献报道对其提取工艺、化学成分以及微量元素进行了分析研究,该复方制剂含有大量的挥发性成分,对其治疗心血管疾病有着重要的作用,但目前文献中并未见对本方所含挥发性化学成分进行系统报道,因此本研究采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析研究气血双补酒中的挥发性化学成分,为其药效物质基础的研究和质量控制提供一定的参考依据。

1 仪器与试药

仪器型号为Agilent 5975C MSD GC-MS,包括7693自动进样器;乙酸乙酯(分析纯,批号:20140201,南京维之诚化学试剂有限公司);无水硫酸钠(分析纯,批号:20140501,南京化学试剂有限公司);娃哈哈纯净水;气血双补酒样品来自南京中医药大学泰州附属医院制剂室;复方中各单味药经南京中医药大学蔡宝昌教授鉴定。

2 实验方法 2.1 挥发油的提取

称取气血双补酒1 000 mL,置于2 000 mL圆底烧瓶中,水蒸气蒸馏提取10 h,至挥发油不再增加,经无水硫酸钠脱水后得到挥发油,同法提取人参、黄芪、当归、炒白芍、陈皮、玉竹、酒黄精、制何首乌、枸杞子,得到各药材的挥发油,本实验挥发油提取率为5.1%。以上挥发油溶液经无水硫酸钠脱水,通过0.45 μm有机滤膜制备即得。

2.2 色谱条件

BP5-5%苯基二甲基聚硅氧烷柱(30 m×250 μm×0.25 μm),初始温度为60 ℃,进样口的温度设置为270 ℃;以5 ℃/min升温速度慢慢升至200 ℃,保持6 min;然后再以5 ℃/min升温速度缓慢升至240 ℃,保持5 min。高纯氦气为载气,分流比例为20:1,流速设置为30 mL/min,每次进样2 μL,Gas saver:关闭。

2.3 质谱条件

离子源的温度为230 ℃,设置接口温度为270 ℃,电子的能量设置为70 eV,四级杆的温度设置为50 ℃,质量扫描的方式选择为全部扫描范围:50~550 amu,设置电子倍增器的电压值为1 553 V。每次进样为2 μL,样品进样2针,使用Nist 11.0标准谱图库进行检索分析。

3 结果与数据分析

实验结果通过质谱软件Chem Station和NIST 11.0标准的质谱检索库进行检索分析,并比对标准质谱谱图进而鉴定化学成分一共得到39种挥发性成分,且各挥发性成分匹配率均在90%以上,成分鉴定的结果详情见表 1。通过优化的色谱质谱条件,对气血双补酒中含有的挥发性成分进行全面的GC-MS分析,采用面积归一化法来测定挥发性各成分的含量,并分析得到气血双补酒挥发性成分的总离子流图,见图 1

表 1 GC-MS鉴定气血双补酒中的挥发性成分 Tab. 1 Components identified of QXSBJ by GC-MS
图 1 气血双补酒挥发油的总离子流图 Fig. 1 GC-MS chromatogram of QXSBJ

本实验通过水蒸气蒸馏的方法提取出气血双补酒中的挥发性化学成分,同时采用GC-MS技术对挥发油提取物进行挥发性化学成分分析研究,利用谱库检索结合药材色谱峰归属对气血双补酒挥发油进行定性分析,应用峰面积百分比法计算相对量,另对各色谱峰进行药材归属研究[3-4]。GC-MS分析结果显示,Ethyl acetate为溶剂峰,其含量最高,其次气血双补酒中富含Isocetic acid(10.24%)、Terpineol(10.01%)、Gamma.-Terpinene(9.95%)、(+)-2-carene(9.74%)、D-Limonene(9.67%)等挥发性成分。色谱峰归属研究表明,来源于人参的挥发性成分有9个、来源于黄芪的挥发性成分有11个、来源于当归的挥发性成分有25个、来源于炒白芍的挥发性成分有5个、来源于陈皮的挥发性成分有20个、来源于玉竹的挥发性成分有7个、来源于酒黄精的挥发性成分有6个、来源于制何首乌的挥发性成分有8个、来源于枸杞子的挥发性成分有2个。

本实验通过GC-MS法能够快速有效地分析气血双补酒中的挥发性成分,为气血双补酒药效物质基础的研究和质量控制提供参考。

参考文献
[1] 孟景春. 孟景春临床经验集[M]. 长沙: 湖南科学技术出版社, 2007: 63-64.
[2] 高杨, 陈林伟, 陈丹妮, 等. HPLC法测定气血双补酒中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量[J]. 中华中医药学刊, 2015, 33 (9): 2095–2097.
[3] 张晓燕, 龚苏晓, 游飞祥, 等. 基于GC-MS的六经头痛片挥发性化学成分研究[J]. 中草药, 2016, 47 (21): 3787–3794.
[4] 杨锦玲, 梅文莉, 董文化, 等. 沉香GC-MS指纹图谱分析[J]. 中成药, 2016, 38 (8): 1765–1770.
Study on volatile chemical constituents of Qixue Shuangbu Tinctura based on GC-MS
CHEN Linwei1, WANG Qin1, PENG Dexi1, YUAN Chengye1, CAI Baochang2, WANG Yi3, WANG Shumei1     
1. The Affiliated Hospital of Taizhou, Nanjing University of Chinese Medicine, Taizhou 225300, China;
2. Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China;
3. Taizhou Institute of Science & Technology, Nanjing University of Science and Technology, Taizhou 225300, China
Abstract: [Objective] The volatile chemical components in Qixue Shuangbu Tinctura were studied by GC-MS analysis. [Methods] Through the method of steam distillation to extract the volatile constituents of Qixue Shuangbu Tinctura, while using the technology of volatile oil extract of volatile chemical components in combination with GC-MS, combined with database retrieval using spectral peaks belonging to the herbs of Qixue Shuangbu Tinctura volatile oil by qualitative analysis, the calculation of relative quantity by peak area percentage method. [Results] From the Qixue Shuangbu Tinctura were identified in the essential oil from the 39 major components, including pentadecanoic (10.24%) the highest relative amount, another of the chromatographic peak of medicinal materials belonging to 39 peaks all belong to medicine. [Conclusion] The volatile components in Qixue Shuangbu Tinctura can be rapidly and effectively analyzed by GC-MS method, providing reference for the research and quality control of the effective substance basis of Qixue Shuangbu Tinctura.
Key words: Qixue Shuangbu Tinctura     GC-MS     volatile oil     component identification