作为传统中药，绵萆薢（Dioscoreae spongiosae Rhizoma）以其干燥根茎入药，具有利湿去浊，祛风除痹之功效，用于治疗膏淋、白浊、白带过多、风湿痹痛、关节不利、腰膝疼痛等症^[1]，主产于湖南、湖北、浙江、江西、福建、广东及广西等地^[2]。绵萆薢中含有的化学成分主要为甾体、二芳基庚烷、木脂素、有机酸及酯等^[3]。药理活性研究表明，绵萆薢及其有效成分具有抗骨质疏松^[4]、抗心肌缺血、抗肿瘤^[5]、抗真菌、调血脂、降尿酸^[6]、预防动脉粥样硬化等作用。临床上用于治疗乳糜尿、慢性前列腺炎、骨质疏松、风湿及类风湿性关节炎及骨关节炎等症状。

笔者在对绵萆薢化学成分研究的过程中，利用与文献^[7-13]类似的方法，分离鉴定出7 个单体化合物。其中，1~3 为首次从薯蓣属中分离得到，4~7 为首次从该植物中分离得到，结构见图 1。

1 仪器与材料

Bruker 500MR 超导核磁共振波谱仪（瑞士Bruker公司，Avance Ⅲ 500MR），大孔吸附树脂（天津海光化工有限公司），ODS（Chromatorex ODS MB，40~75 μm，日本YMC 有限公司）；Sephadex LH-20（瑞典Ge Healthcare Bio-Sciences AB公司），Cosmosil 5C18-MS-Ⅱ制备柱和分析柱（250 mm×4.6 mm和250 mm×20 mm，均为5 μm，Japan，Nacalai Tesque 公司），TLC Silica gel 60 F₂₅₄（Aluminium sheets 20 cm × 20 cm，德国Merck 公司）。

色谱/分析纯氯仿、甲醇、乙腈、丙酮、冰醋酸等试剂购自天津康科德科技有限公司。

绵萆薢购自河北安国，由天津中医药大学李天祥副教授鉴定为薯蓣科植物绵萆薢（Dioscorea spongiosa J. Q. Xi, M. Mizuno et W. L. Zhao）。

2 提取与分离

取绵萆薢干燥根（7.8 kg）经18、16 倍量70% EtOH 加热回流2 次（3、2 h），合并滤液，减压回收溶剂，得浸膏1 150.0 g。上述浸膏（1 000.0 g）经D101 大孔吸附树脂处理（H₂O → 95% EtOH → Acetone），得到H₂O、95% EtOH 和Acetone 洗脱物分别为725.0、245.0 及1.9 g。

95% EtOH 洗脱物（150.0 g）经硅胶柱层析[CHCl₃-MeOH（100:1 → 100:3 → 100:7，V/V）→ CHCl₃-MeOH-H₂O（10:3:1 →7:3:1 → 6:4:1，V/V/V，下层）]，共得12 个组分（Fr.1~12）。

Fr. 6（14.0 g）经ODS 柱层析[MeOH-H₂O（20:80 → 30:70 → 40:60 → 50:50 → 60:40 → 70:30 → 80:20 → 100:0，V/V）]，得到17 个组分（Fr. 6-1~6-17）。Fr. 6-1（1 170.0 mg）经制备型高效液相色谱法（PHPLC）分离制备[H₃CN-H₂O（3:97，V/V）]，得到17 个组分（Fr.6-1-1~6-1-17）。Fr. 6-1-6（26.9 mg）、6-1-9（13.8 mg）、6-1-11（29.0 mg）、Fr. 6-1-14（90.9 mg）分别经Sephadex LH-20 凝胶柱层析（MeOH），得到Tachioside（1，20.0 mg）、Isotachioside（2，7.9 mg）、3，5-二甲氧基熊果苷（3，25.6 mg）和2，6-二甲氧基-4-羟基-苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4，36.3 mg）。Fr. 6-1-15（119.4 mg）经PHPLC 分离制备[MeOH-H₂O（8:92，V/V）+1% HAc]，得到腺苷（7，50.0 mg）和淫羊藿次苷D₂（5，36.0 mg）。Fr. 6-3（241.0 mg）经PHPLC 分离制备[H₃CN-H₂O（10:90，V/V）+1% HAc]，得到苯甲醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（6，9.8 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS 给出其准分子离子峰m/z 301.093 2 [M-H]^-，确定其分子式为C₁₃H₁₈O₈（Calcd for C₁₃H₁₇O₈，301.092 9）。¹H-NMR（500 MHz，C₅D₅N）： δ 7.14（1H，br. s，H-3），7.04（1H，br. d，ca. J=9 Hz，H-5），7.13（1H，d，J=8.5 Hz，H-6），5.54（1H，d，J = 7.0 Hz，H-1′），4.36（2H，m，overlapped，H-2′ and H-3′），4.32（1H，dd，J = 7.5、8.0 Hz，H-4′），4.10（1H，m，H-5′），[4.38（1H，dd，J = 4.5、11.5 Hz）、4.57（1H，br. d，ca. J = 12 Hz），H₂-6']，3.70（3H，s，2-OCH₃）。其¹H-、¹³C-NMR（125 MHz，C₅D₅N，见表 1）谱数据与文献^[14]相对照，鉴定该化合物为Tachioside。

化合物2：白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS 给出其准分子离子峰m/z 301.092 8 [M-H]^-，确定其分子式为C₁₃H₁₈O₁₃（Calcd for C₁₃H₁₇O₁₃，301.092 9）。¹H-NMR（500 MHz，CD₃OD）：δ 6.46（1H，d，J = 2.0 Hz，H-3），6.30（1H，dd，J = 2.0、8.5 Hz，H-5），7.02（1H，d，J = 8.5 Hz，H-6），4.70（1H，d，J = 7.0 Hz，H-1'），3.44（2H，m，overlapped，H-2′and H-5′），3.33（1H，dd，J = 7.5、8.0 Hz，H-3′），3.38（1H，dd，J = 8.0、9.5 Hz，H-4′），[3.69（1H，dd，J = 5.5、12.0 Hz）、3.86（1H，br. d，ca. J = 12 Hz），H₂-6′，3.81（3H，s，2-OH₃）。其¹H-、¹³C-NMR（125 MHz，CD₃OD，见表 1）谱数据与文献^[15]相对照，鉴定该化合物为Isotachioside。

化合物3：白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS 给出其准分子离子峰m/z 331.103 9 [M-H]^-，确定其分子式为C₁₄H₂₀O₉（Calcd for C₁₄H₁₉O₉，331.103 5）。¹H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）：δ 6.38（2H，s，H-2, 6），4.69（1H，d，J = 7.5 Hz，H-1′），3.20（1H，dd，J = 7.5、9.0 Hz，H-2′），3.26（1H，dd，J = 9.0、9.0 Hz，H-3′），3.11（1H，dd，J = 9.0、9.0 Hz，H-4′），3.30（1H，m，H-5′），[3.40（1H，dd，J = 5.0、12.0 Hz）、3.72（1H，m，overlapped），H₂-6′]，3.72（6H，s，3，5-OH₃）。其¹H-、¹³C-NMR（125 MHz，DMSO-d6，见表 1）谱数据与文献^[16]相对照，鉴定该化合物为3, 5-二甲氧基熊果苷（koaburaside）。

化合物4：白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS 给出其准分子离子峰m/z 331.104 2 [M-H]^-，确定其分子式为C₁₄H₂₀O₉（Calcd for C₁₄H₁₉O₉，331.103 5）。¹H-NMR（500 MHz，C₅D₅N）：δ 6.55（2H，s，H-3, 5），5.53（1H，d，J = 7.0 Hz，H-1′），4.28（3H，m，overlapped，H-2′-4′），3.88（1H，m，H-5′），[4.30（1H，dd，J = 5.5、12.0 Hz）、4.38（1H，dd，J = 2.0、11.5 Hz），H₂-6′]，3.70（6H，s，2, 6-OH₃）。其¹H-、¹³C-NMR（125 MHz，C₅D₅N，见表 1）谱数据结合¹H-1H COSY、HSQC、HMBC等2D-NMR 谱的解析，鉴定该化合物为文献^[17]所报道的2, 6-二甲氧基-4-羟基-苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2, 6-dimethoxy-4-hydroxyphenol-1-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物5：白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS 给出其准分子离子峰m/z 345.120 2 [M+COOH]^-，确定其分子式为C₁₄H₂₀O7（Calcd for C15H₂1O₉，345.119 1）。¹H-NMR（500 MHz，CD₃OD）：δ 7.14（2H，d，J = 8.5 Hz，H-2, 6），7.02（2H，d，J=8.5 Hz，H-3, 5），2.76（2H，t，J = 7.0 Hz，H₂-7），3.69（2H，t，J =7.0 Hz，H₂-8），4.86（1H，d，J=7.0 Hz，H-1′），3.45（2H，m，overlapped，H-2′ and 3′），3.40（2H，overlapped，H-4′ and 5′），[3.69（1H，m，overlapped）、3.88（1H，dd，J=1.5、13.0 Hz），H₂-6′]。其¹H-、¹³C-NMR（125 MHz，CD₃OD，见表 1）谱数据与文献^[18]相对照，鉴定该化合物为淫羊藿次苷D₂（Icariside D₂）。

化合物6：白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS 给出其准分子离子峰m/z 315.110 0[M+COOH]^-，确定其分子式为C₁₃H₁₈O₆（Calcd for C₁₄H₁₉O₈，315.108 5）。¹H-NMR（500 MHz，CD₃OD）：δ 7.42（2H，br. d，ca. J= 7 Hz，H-2, 6），7.33（2H，t，J=7.0 Hz，H-3，5），7.27（1H，br. d，ca. J=7 Hz，H-4），4.67、4.93（1H each，both d，J=11.5 Hz，H₂-7），4.35（1H，d，J = 7.0 Hz，H-1′），3.25（2H，m，H-2′ and 5′），3.35（1H，dd，J=7.5、8.0 Hz，H-3′），3.30（1H，dd，J = 8.0、8.0 Hz，H-4'），[3.69（1H，dd，J = 5.0、12.0 Hz）、3.90（1H，br. d，ca. J =12 Hz），H₂-6′]。其¹H-、¹³C-NMR（125 MHz，CD₃OD，见表 1）谱数据与文献^[19]相对照，鉴定该化合物为苯甲醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（benzyl alcohol O-β-D-glucopyranoside）。

化合物7：白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS 给出其准分子离子峰m/z 266.090 2 [M-H]^-，确定其分子式为C₁₀H₁₃N₅O₄（Calcd for C₁₀H12N₅O₄，266.089 5）。¹H-NMR（500 MHz，DMSO-d₆）：δ 8.17（1H，s，H-2），8.38（1H，s，H-8），7.38（2H，s，6-NH₂），5.91（1H，d，J=5.5 Hz，H-1′），4.64（1H，dd，J=3.0、5.5 Hz，H-2′），4.18（1H，t，J=3.0 Hz，H-3′），4.00（1H，m，H-4′），[3.59（1H，dd，J=4.0、12.0 Hz）、3.71（1H，dd，J=3.0、12.0 Hz），H₂-5′]。其¹H-、¹³C-NMR（125 MHz，DMSO-d₆，见表 1）谱数据与文献^[20]相对照，鉴定该化合物为腺苷（Adenosine）。

4 结果

为了进一步扩大对绵萆薢的开发与利用，笔者运用色谱和波谱学方法，对绵萆薢的化学成分进行了研究，分离并鉴定了以下7 个单体成分，分别是Tachioside（1）、Isotachioside（2）、3，5－二甲氧基熊果苷（3）、2，6－二甲氧基－4－羟基－苯酚－1－O－β－D－吡喃葡萄糖苷（4）、淫羊藿次苷D₂（5）、苯甲醇－O－β－D－吡喃葡萄糖苷（6）、腺苷（7）。其中，化合物1～3 为首次从薯蓣属中分离得到，4～7 为首次从该植物中分离得到。

5 讨论

绵萆薢最早记录于《神农本草经》，历史久远且疗效显著。但国内外对绵萆薢化学成分的研究报道尚少，据文献报道, 其化学成分主要是甾体皂苷、二芳基庚烷、木脂素类等；具有抗骨质疏松、抗心肌缺血、抗肿瘤、抗真菌、调血脂、降尿酸、预防动脉粥样硬化等药理作用。因此，进一步开发与利用该植物，加强其化学成分与药理活性的筛选，可对其临床治疗与应用有指导性意义。