在中国，菊花（Chrysanthemum morifolium Ramat.）为常用大宗中药材，具有散风，平肝明目，清热解毒的功效，临床上主要用于治疗风热感冒，头痛眩晕，目赤肿痛，眼耳昏花等症^[1-2]。现代药理作用表明菊花具有治疗冠心病、降低血压、预防高血脂、抗菌、抗病毒、抗炎及预防衰老等多种生理活性^[3]。菊花产地广，用量大，但采摘菊花的同时，大量的叶被丢弃。菊的叶能否代替花入药，进而提高现有药用植物资源的再生能力和内在质量，是值得深入研究的一个课题。因此，本课题对河北安国产祁菊叶的化学成分进行了初步研究，为该植物的进一步研究与开发利用提供物质基础。

笔者采用多种色谱法相结合，对祁菊叶70%乙醇提取物的化学成分进行分离纯化，并通过理化性质及波谱分析鉴定了6个单体化合物的结构^[4-7]，分别为茵芋苷（1），菊苣苷（2），苯甲基-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3），苄醇-O-[β-D-吡喃葡萄糖(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷（4），icariside D1（5），松柏苷（6）。其中，化合物4、5为首次从菊属植物中分离得到。

1 实验材料与仪器

正相柱色谱用硅胶（48~75 μm），ODS（Chromatorex ODS MB，40~75 μm，日本Fuji Silisia Chemical公司），Sephadex LH-20（瑞典Ge Healthcare Bio-Sciences AB公司），D101大孔吸附树脂（净品级，天津海光化工有限公司），高效液相色谱法（HPLC）用分析柱以及制备柱型号分别为Cosmosil 5C₁₈-MS-Ⅱ（250 mm×4.6 mm，5 μm）及（250 mm×20 mm，5 μm，日本Nacalai Tesque公司），氘代试剂（北京崇熙科技孵化器公司）。

实验所用试剂（色谱纯或分析纯）均为天津康科德科技有限公司。

祁菊叶采集于河北安国，由天津中医药大学中药标本馆李天祥教授鉴定为（Chrysanthemum morifolium Ramat. Qiju）的干燥叶，标本保存于天津中医药大学中医药研究中心。

2 提取与分离

取干燥祁菊叶3.0 kg，用10、8、8倍量70%乙醇（EtOH）溶液依次加热回流提取3次，减压回收溶剂，得浸膏260.1 g。取浸膏255 g溶于水，用CHCl₃ -H₂O萃取，得到CHCl₃和H₂O层萃取物分别为20.5 g和234.5 g。H₂O层萃取物（225.0 g）经D101大孔吸附树脂柱分离（H₂O→95% EtOH），得到H₂O、95% EtOH洗脱物各155.1 g、55.1 g。取上述95% EtOH洗脱物（40.0 g）经硅胶柱层析[CHCl₃ →CHCl₃ -MeOH（100:5，V/V）→ CHCl₃ -MeOH-H₂O（20:3:1→10:3:1→7:3:1→6:4:1，V/V/V，下层）→ MeOH]，得到15个组分（Fr. 1~Fr. 15）。Fraction 8-（3+4+5）（175.6 mg）经制备型高效液相色谱法（PHPLC）分离制备[CH₃CN-H₂O（13:87，V/V）+ 1% HAc]，得到茵芋苷（1，5.6 mg）和松柏苷（6，5.6 mg）。Fraction 8-（7+8）（426.0 mg）经PHPLC分离制备[MeOH-H₂O（20:80，V/V）+1% HAc]，得到苯甲基-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3，44.7 mg）。Fraction 9（3.8 g）经PHPLC制备[MeOH-H₂O（25:75→35:65→45:55→65:35→100:0，V/V）]，得到26个组分[Fr. 9-1~Fr. 9-26]。Fraction 9-(4+5)（71.7 mg）经PHPLC分离制备[CH₃CN-H₂O（13:87，V/V）+ 1% HAc]，得到菊苣苷（2，10.8 mg）。Fraction 9-14（177.9 mg）经PHPLC分离制备[CH₃CN-H₂O（18:82，V/V）+ 1% HAc]，得到icariside D1（5，15.0 mg）。Fraction 10（4.6 g）经PHPLC制备[MeOH-H₂O（25:75→35:65→45:55→65:35→100:0，V/V）]，得到18个组分[Fr. 10-1~Fr. 10-18]。Fraction 10-3（168.4 mg）经PHPLC分离制备[CH₃CN-H₂O（8:92，V/V）+ 1% HAc]，得到苄醇-O-[β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（4，7.9 mg）。化合物结构式，见图 1。

3 结构鉴定

化合物1：白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 359.053 5 [M+Cl]^-，确定其分子式为C₁₅H₁₆O₈（C₁₅H₁₆O₈Cl，359.053 9）。¹H NMR（CD₃OD，400 MHz）谱数据：δ 6.28（1H，d，J=9.6 Hz，H-3），7.89（1H，d，J=9.6 Hz，H-4），7.56（1H，d，J=8.8 Hz，H-5），7.08（2H，m，H-6, 8），5.03（1H，d，J=7.2 Hz，H-1′），3.31~3.93（4H，H-2′~5′），[3.70（1H，dd，J=5.6、12.0 Hz），3.91（1H，br. d，ca. J=12 Hz），H₂-6′]。¹³C NMR（CD₃OD，100 MHz）谱数据：δ 163.1（C-2），115.2（C-3），145.5（C-4），130.4（C-5），115.2（C-6），162.2（C-7），105.0（C-8），114.3（C-9），156.7（C-10），101.9（C-1′），74.7（C-2′），77.9（C-3′），71.2（C-4′），78.3（C-5′），62.4（C-6′）。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献^[8]相对照，并结合2D NMR谱的解析，鉴定该化合物为茵芋苷。

化合物2：白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 339.072 0 [M-H]^-，确定其分子式为C₁₅H₁₆O₉（calcd for C₁₅H₁₅O₉，339.072 2）。¹H NMR（CD₃OD，400 MHz）谱数据：δ 6.28（1H，d，J=9.6 Hz，H-3），7.82（1H，d，J=9.6 Hz，H-4），7.20（1H，s，H-5），7.04（1H，s，H-8），4.97（1H，d，J=6.8 Hz，H-1′），3.42~3.95（6H，H-2′~6′）。¹³C NMR（CD₃OD，100 MHz）谱数据：δ 162.3（C-2），113.9（C-3），145.6（C-4），115.3（C-5），145.5（C-6），149.6（C-7），105.4（C-8），114.8（C-9），150.5（C-10），103.1（C-1′），74.7（C-2′），77.5（C-3′），71.3（C-4′），78.5（C-5′），62.3（C-6′）。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献^[9]相对照，并结合2D NMR谱的解析，鉴定该化合物为菊苣苷。

化合物3：白色油状物。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 305.078 2 [M+Cl]^-，确定其分子式为C₁₃H₁₈O₆（calcd for C₁₃H₁₈O₆Cl，305.079 7）。¹H NMR（CD₃OD，400 MHz）谱数据：δ 7.41（2H，d，J=7.6 Hz，H-2, 6），7.31（2H，d，J=7.6 Hz，H-3, 5），7.26（1H，t，J=7.6 Hz，H-4），[4.66（1H，d，J=11.6 Hz），4.92（1H，d，J=11.6 Hz）H₂-7]，4.35（1H，d，J=7.6 Hz，H-1′），3.29（1H，dd，J=7.6、8.0 Hz，H-2′），3.35（1H，dd，J=8.0、8.0 Hz，H-3′），3.32（1H，dd，J=8.0、8.0 Hz，H-4′），3.30（1H，m，H-5′），[3.44（1H，dd，J=5.2、12.0 Hz），3.90（1H，br. d，ca. J=12 Hz），H₂-6′]。¹³C NMR（CD₃OD，100 MHz）谱数据：δ 139.1（C-1），129.2（C-2, 6），129.3（C-3，5），128.7（C-4），71.8（C-7），103.3（C-1′），75.1（C-2′），78.1（C-3′），71.7（C-4′），78.0（C-5'），62.8（C-6′）。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献^[10]相对照，并结合2D NMR谱的解析，鉴定该化合物为苯甲基-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物4：白色固体。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 467.132 2 [M+Cl]^-，确定其分子式为C₁₉H₂₈O₁₁（calcd for C₁₉H₂₈O₁₁Cl，467.132 6）。¹H NMR（C₅D₅N，400 MHz）谱数据：δ 7.56（2H，d like，ca. J=8 Hz，H-2, 6），7.54（2H，t，J=8.4 Hz，H-3，5），7.25（1H，m，H-4），[4.82（1H，d，J=12.0 Hz），5.22（1H，d，J=12.0 Hz），H₂-7]，4.33（1H，d，J=7.2 Hz，H-1′），4.36（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），3.91~4.54（10H，m，H-2′~6′ and H-2″~6″）。¹³C NMR（C₅D₅N，100 MHz）谱数据：δ 138.9（C-1），128.5（C-2，6），128.6（C-3，5），127.7（C-4），71.6（C-7），103.9（C-1′），75.1（C-2′），77.4（C-3′），70.9（C-4′），78.5（C-5′），70.1（C-6′），105.6（C-1″），75.3（C-2″），78.5（C-3″），71.6（C-4″），78.5（C-5″），62.7（C-6″）。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献^[11]相对照，并结合2D NMR谱的解析，鉴定该化合物为苄醇-O-[β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）]-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物5：白色油状物。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 451.135 8[M+Cl]^-，确定其分子式为C₁₉H₂₈O₁₀（calcd for C₁₉H₂₈O₁₀Cl，451.137 6）。¹H NMR（C₅D₅N，400 MHz）谱数据：δ 7.28（2H，d like，ca. J=8 Hz，H-2, 6），7.26（1H，t，J=7.2、8.0 Hz，H-3，5），7.18（1H，m，H-4），2.99（2H，dd，J=7.2、8.0 Hz，H2-7），[3.88（1H，dt，J=7.2、9.6 Hz），4.33（1H，dt，J=8.0、9.2 Hz）H₂-8]，4.82（1H，d，J=7.6 Hz，H-1′），4.00（1H，dd，J=7.6、8.0 Hz，H-2′），4.07（1H，dd，J=8.0、8.0 Hz，H-3'），4.04（1H，dd，J=8.0、8.0 Hz，H-4′），4.07（1H，m，H-5′），[4.21（1H，m），4.72（1H，br. d，ca. J=10 Hz），H₂-6′]，5.84（1H，d，J=2.8 Hz，H-1″），4.78（1H，d，J=2.4 Hz，H-2″），[4.53（1H，d，J=9.6 Hz），4.34（1H，d，J=9.6 Hz），H-5″]，4.14（2H，s，H₂-6″）。¹³C NMR（C₅D₅N，100 MHz）谱数据：δ 139.4（C-1），128.7（C-2，6），129.4（C-3，5），126.4（C-4），36.6（C-7），70.6（C-8），104.7（C-1′），75.0（C-2′），78.5（C-3′），71.6（C-4′），77.2（C-5′），68.8（C-6′），111.1（C-1″），77.9（C-2″），80.7（C-3″），74.9（C-4″），65.5（C-5″）。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献^[12]相对照，并结合2D-NMR谱的解析，鉴定该化合物为icariside D1。

化合物6：白色无定形粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 377.101 0 [M+Cl]^-，确定其分子式为C₁₆H₂₂O₈（calcd for C₁₆H₂₂O₈Cl，377.100 9）。¹H NMR（CD₃OD，400 MHz）谱数据：δ 7.07（1H，br. s，H-2），6.94（1H，br. d，ca. J=8 Hz，H-5），7.10（1H，d，J=7.6 Hz，H-6），6.54（1H，d，J=16.0 Hz，H-7），6.27（1H，dt，J=6.0、15.6 Hz，H₂-8），4.20（2H，d，J=6.0 Hz，H₂-9），4.89（1H，d，J=7.5 Hz，H-1′），3.31~3.86（6H，H-2′~6′），3.87（3H，s，2-OCH₃）。¹³C NMR（CD₃OD，100 MHz）谱数据：δ 147.6（C-1），150.9（C-2），111.4（C-3），133.7（C-4），117.9（C-5），120.8（C-6），128.9（C-7），131.3（C-8），63.7（C-9），102.8（C-1′），74.9（C-2′），77.8（C-3′），71.3（C-4′），78.2（C-5′），62.5（C-6′），56.7（2-OCH₃）。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献^[13]相对照，并结合2D NMR谱的解析，鉴定该化合物为松柏苷。

4 结果与讨论

查阅相关文献时发现，多种药用植物的非药用部位均具有开发利用价值，如以三七茎叶为原料开发的新药七叶神安片，具有抗炎镇痛治疗偏头痛的效果^[14]。还有以黄芪茎叶总黄酮为原料开发制得的新药黄芪茎叶解毒胶囊，具有治疗急性咽炎的作用^[15]。这些研究即利用了药用植物的非药用部位减少了资源的浪费，且又产生了经济效益。祁菊叶产量很大，若能加以利用，既可保护生态，又可推动经济的发展。但是，需要有相应的科学研究加以佐证。笔者首先对其叶的化学成分进行研究，为祁菊植株不同部位的综合开发利用提供实验依据。在此过程中，从其70%乙醇提取物中鉴定了6个单体成分。其中，4、5为首次从菊属植物中分离得到。