白鲜皮是白鲜（Dictamnus dasycarpus Turcz.）的干燥根皮，其主要成分为萜、柠檬苦素、生物碱、脂肪酸等化学成分，首录于《神农本草经》中品系列，性苦、寒，归脾、胃、膀胱经，具有清热燥湿、祛风解毒之功效^[1]。现代药理研究表明，白鲜皮具有抗菌、抗肿瘤、抗炎、抗变态反应、抗溃疡、抗冠状动脉粥样硬化及保护肝脏、神经等多种生理活性^[2]。作者采用多种色谱法相结合，对白鲜皮70%乙醇提取物的化学成分进行分离制备，并利用与文献^[3-4]类似的方法，鉴定了5个脂肪酸类化合物，分别为亚油酸（1）、1-O-linoleoyl-glycerol（2）、油酸（3）、棕榈酸（4）、α-棕榈酸单甘油酯（5）。其中2为首次从白鲜属中分离得到，5为首次从该植物中分离得到的化合物。图 1。

1 仪器与材料

Bruker 500MR超导核磁共振波谱仪（德国Bruker公司，Avance Ⅲ 500 MR），安捷伦6520系列四级杆-飞行时间质谱仪（美国Aglient公司，6520 Accurate-Mass Q-TOF LC/MS）。正相柱色谱用硅胶（48~75 μm），高效液相色谱法用分析柱以及制备柱型号分别为[Cosmosil 5C₁₈-MS-Ⅱ（250 mm × 4.6 mm，5 μm）及（250 mm × 20 mm，5 μm），Cosmosil PBr（250 mm × 4.6 mm，5 μm）及（250 mm × 20 mm，5 μm），日本Nacalai Tesque公司]，氘代试剂（北京崇熙科技孵化器公司）。分析/色谱纯氯仿、乙酸乙酯、石油醚、正己烷、甲醇、乙腈、冰醋酸等试剂购自天津康科德科技有限公司。白鲜皮购自于河北安国，由天津中医药大学李天祥教授鉴定为白鲜属植物白鲜（Dictamnus dasycarpus Turcz.）的干燥根皮。标本保存于天津中医药大学中医药研究中心。

2 提取与分离

取干燥白鲜皮（9.0 kg），用70%乙醇溶液加热回流提取，减压回收溶剂，得浸膏1 910.1 g。取浸膏1 725.3 g溶于水，用EtOAc-H₂O萃取，得到EtOAc和H₂O层萃取物分别为267.3 g和1454.9 g。EtOAc层萃取物（175.0 g）经硅胶柱层析[正己烷-乙酸乙酯（100:1 → 20:1 → 10:1 → 5:1 → 3:1 → 1:1 → 0:1，v/v）→ MeOH]，得到10个组分（Fr. E1~Fr. E10）。Fraction E5（3.9 g）经制备型高效液相色谱法（PHPLC）分离制备[MeOH-H₂O（90:10，v/v）5C18-MS-Ⅱ柱]，得到10个组分（Fr. E5-1~5-10）。Fraction E5-8（190.0 mg）经PHPLC分离制备[MeOH-H₂O（88:12，v/v）+ 1% HAc，PBr柱]，得到棕榈酸（4，57.2 mg）和油酸（3，32.3 mg）。Fraction E6（13.0 g）经硅胶柱层析[石油醚-氯仿（1:1 → 1:5，V/V）→氯仿-丙酮（100:0 → 100:1 → 100:2 →0:100，V/V）]，得到5个组分（Fr. E6-1~Fr. E6-5）。Fraction E6-3（3.4 g）经PHPLC分离制备[MeOH-H₂O（85:15，v/v），PBr柱]，得到8个组分（Fr. E6-3-1~Fr. E6-3-8）。Fraction E6-3-6（107.3 mg）经PHPLC分离制备[MeOH-H₂O（90:10，V/V），PBr柱]，得亚油酸（1，34.5 mg）。Fraction E8（37.0 g）经正己烷溶解后离心，将上清液（35.1 g）经硅胶柱层析[石油醚-乙酸乙酯（5:1 → 3:1 → 2:1 → 1:1 → 0:1，V/V）]，得到9个组分（Fr. E8-2-1~Fr. E8-2-9）。Fraction E8-2-6（7.1 g）经硅胶柱层析[石油醚-乙酸乙酯（5:1 → 4:1 → 3:1 → 2:1 → 1:1 → 0:1，V/V）→甲醇]，得8个组分（Fr. E8-2-6-1~Fr. E8-2-6-8）。Fraction E8-2-6-4（3.5 g）经PHPLC分离制备[MeOH-H₂O（85:15，V/V），5C18-MS-Ⅱ柱]，得到10个组分（Fr. E8-2-6-4-1~Fr. E8-2-6-4-10）。Fraction E8-2-6-4-6（50.1 mg）与E8-2-6-4-7（66.7 mg）分别经PHPLC分离制备[MeOH-H₂O（90:10，V/V），5C18-MS-Ⅱ柱]，得到1-O-linoleoyl-glycerol（2，33.5 mg）和α-棕榈酸单甘油酯（5，29.5 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：黄色油状固体。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 279.2324 [M-H]^-（calcd for C₁₈H₃₁O₂，279.2330），确定其分子式为C₁₈H₃₂O₂。¹H NMR（CDCl₃，500 MHz）谱数据：δ 2.33（2H，t，J = 7.5 Hz，H₂-2），1.63（2H，m，H₂-3），1.32（10H，m，H₂-4~7 and 15），2.05（4H，m，H₂-8 and 14），5.37（2H，m，H-9 and 13），5.34（1H，m，overlapped，H-10），2.77（2H，t，J = 7.0 Hz，H₂-11），5.34（1H，m，overlapped，H-12），1.28（2H，m，H₂-16），1.27（2H，m，H₂-17），0.89（3H，t，J = 6.5 Hz，H₃-18）。¹³C NMR（CDCl₃，125 MHz）谱数据：δ 180.0（C-1），34.2（C-2），24.8（C-3），29.1~29.6（C-4~7 and 15），27.2（C-8 and 14），130.2（C-9 and 13），128.1（C-10），25.7（C-11），127.9（C-12），31.6（C-16），22.6（C-17），14.1（C-18）。C-8和C-14的化学位移为27.2，确定其构型为9Z，12Z^[5-6]。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献中报道的亚油酸基本一致，故鉴定化合物1为亚油酸（linoleic acid）。

化合物2：黄色油状固体。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 433.1956 [M+Br]-（calcd for C₂₁H₃₈O₄Br，433.1959），确定其分子式为C₂₁H₃₈O₄。¹H NMR（C₅D₅N，500 MHz）谱数据：δ 2.34（2H，t，J = 7.5 Hz，H₂-2），1.63（2H，m，H₂-3），1.14~1.28（6H，m，H₂-4~6），1.34（2H，m，H₂-7），2.08（2H，m，H₂-8），5.47（2H，m，H-9 and 13），5.48（2H，m，H-10 and 12），2.91（2H，t，J = 5.5 Hz，H₂-11），2.11（2H，m，H₂-14），1.36（2H，m，H₂-15），1.26（2H，m，overlapped，H-16 and 17），0.86（3H，t，J = 7.5 Hz，H₃-18），[4.63（1H，dd，J = 6.5、11.0 Hz），4.70（1H，dd，J = 4.5、11.0 Hz），H₂-1']，4.44（1H，m，H-2'），4.11（2H，d，J = 5.5 Hz，H₂-3'）。¹³C NMR（C₅D₅N，125 MHz）谱数据：δ 173.7（C-1），34.4（C-2），25.3（C-3），29.4（C-4 and 6），29.5（C-5），29.9（C-7），27.5（C-8 and 14），130.4（C-9 and 13），128.4（C-10 and 12），26.0（C-11），29.6（C-15），31.7（C-16），22.8（C-17），14.2（C-18），66.8（C-1'），70.9（C-2'），64.3（C-3'）。C-8和C-14的化学位移为27.5，确定其构型为9Z，12Z。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献相对照，鉴定该化合物为1-O-linoleoyl-glycerol。

化合物3：黄色油状固体。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 281.2475 [M-H]^-（calcd for C₁₈H₃₃O₂，281.2486），确定其分子式为C₁₈H₃₄O₂。¹H NMR（C₅D₅N，500 MHz）谱数据：δ 2.51（2H，t，J = 7.5 Hz，H₂-2），1.79（2H，m，H₂-3），1.24~1.40（16H，m，H₂-4~7 and 12~15），2.09（4H，m，H₂-8 and 11），5.47（2H，m，H-9 and 10），1.24（2H，m，overlapped，H₂-16），1.24（2H，m，overlapped，H₂-17），0.87（3H，t，J = 6.5 Hz，H₃-18）。¹³C NMR（C₅D₅N，125 MHz）谱数据：δ 176.1（C-1），34.9（C-2），25.7（C-3），29.5~30.1（C-4~7 and 12~15），27.5（C-8 and 11），130.2（C-9 and 10），32.1（C-16），22.9（C-17），14.3（C-18）。C-8和C-11的化学位移为27.5，确定其构型为9Z^[5-6]。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献^[6]相对照，鉴定该化合物为油酸（oleic acid）。

化合物4：白色固体。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 255.2325 [M-H]^-（calcd for C₁₆H₃₁O₂，255.2330），确定其分子式为C₁₆H₃₂O₂。¹H NMR（C₅D₅N，500 MHz）谱数据：δ 2.51（2H，t，J = 7.0 Hz，H₂-2），1.79（2H，m，H₂-3），1.20~1.41（20H，m，overlapped，H₂-4~13），1.25（2H，m，H₂-14），1.24（2H，m，H₂-15），0.87（3H，t，J = 7.0 Hz，H₃-16）。¹³C NMR（C₅D₃N，125 MHz）谱数据：δ 176.0（C-1），34.9（C-2），25.7（C-3），29.6~30.0（C-4~13），32.2（C-14），23.0（C-15），14.3（C-16）。该化合物的结构经1D NMR及包括¹H ¹H COSY、HSQC及HMBC在内的2D NMR谱的解析，鉴定为棕榈酸（palmitic acid）^[9]。

化合物5：白色固体。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 365.2474 [M+Cl]^-calcd for C₁₉H₃₈O₄Cl，365.2464），确定其分子式为C₁₉H₃₈O₄。¹H NMR（C₅D₅N，500 MHz）谱数据：δ 2.37（2H，t，J = 7.5 Hz，H₂-2），1.66（2H，m，H₂-3），1.21~1.26（24H，m，overlapped，H₂-4~H₂-15），0.89（3H，t，J = 7.0 Hz，H₃-16），[4.66（1H，dd，J = 5.5、11.0 Hz），4.73（1H，dd，J = 4.5、11.0 Hz），H₂-1']，4.47（1H，m，H-2'），4.13（2H，d，J = 5.5 Hz，H₂-3'）。¹³C NMR（C₅D₅N，125 MHz）谱数据：δ 173.7（C-1），34.4（C-2），25.3（C-3），29.4~30.0（C-4~C-13），32.2（C-14），22.9（C-15），14.3（C-16），66.8（C-1'），70.9（C-2'），64.3（C-3'）。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献^[10]相对照，并结合2D NMR的解析，鉴定该化合物为α-棕榈酸单甘油酯（glyceryl α-mono-palmitate）。

4 总结与讨论

由于传统中药多采取水煎的服药方法，脂肪酸的药理作用长期以来未得到足够的重视。近年来，随着对脂肪酸成分研究的不断深入，其抑菌、抗炎、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、抗氧化以及调节中枢神经系统的活性陆续被挖掘出来。本课题以白鲜皮为例，对其中的脂肪酸类化合物进行了初步化学成分研究，以期为后续药理学研究奠定了物质基础。