花生衣(Arachis hypogaea Linn.)，又称花生皮，是一味传统中药，性味甘、涩、平，入肺、脾、肝经，具有健脾和胃、养血止血，散瘀消肿之功^[1]。现代药理研究表明，花生衣具有抗氧化、抗过敏、降血糖、降血脂及防止血小板减少等多种生理活性^[2-3]。花生衣作为花生加工中的副产物，来源广泛，价格低廉，但目前多作为饲料和燃料，利用度低，难以体现其应用价值。为扩大花生衣的应用范围，提高其药用植物资源利用率，本课题对花生衣的化学成分进行了初步研究，为该植物的进一步研究与开发利用提供物质基础。作者采用多种色谱法对花生衣50%乙醇提取物的化学成分进行分离制备，并利用与文献[4-8]类似的方法，鉴定了12个单体化合物的结构，分别为对羟基苯甲酸(1)、原儿茶酸(2)、原儿茶酸甲酯(3)、原儿茶酸乙酯(4)、对香豆酸(5)、儿茶素(6)、表儿茶素(7)、rhodonidin A(8)、槲皮素(9)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(10)、异鼠李素-3-O-芸香糖苷(11)、3′，5，7-trihydroxyisoflavone-4′-methoxy-3′-O-β-glucopyranoside(12)。其中8为首次从落花生属中分离得到，3为首次从该植物中分离得到的化合物，见图 1。

1 仪器与材料

Bruker 500MR超导核磁共振波谱仪(德国Bruker公司，Avance Ⅲ 500 MR)，安捷伦6500系列四级杆-飞行时间质谱仪(美国Aglient公司，6520 Accurate-Mass Q-TOF LC/MS)。正相柱色谱用硅胶(48~75 μm)，高效液相色谱法(HPLC)用分析柱以及制备柱[Cosmosil 5C₁₈-MS-Ⅱ(250 mm×4.6 mm，5 μm)及(250 mm×20 mm，5 μm)；Cosmosil PBr(250 mm×4.6 mm，5 μm)及(250 mm×20 mm，5 μm)，日本Nacalai Tesque公司]，氘代甲醇(CD₃OD)和二甲基亚砜(DMSO-d₆，北京崇熙科技孵化器公司)。分析和色谱纯二氯甲烷(CH₂Cl₂)、乙酸乙酯(EtOAc)、甲醇(MeOH)、乙腈(CH₃CN)、冰醋酸(HAc)等试剂购自天津康科德科技有限公司。

花生衣由山东翔宇健康制药有限公司提供，由天津中医药大学李天祥教授鉴定为落花生属植物花生的干燥种皮。标本保存于天津中医药大学中医药研究院。

2 提取与分离

取干燥花生衣(8.0 kg)，用50%乙醇溶液依次加热回流提取，减压回收溶剂，得浸膏2 024.4 g。取上述浸膏1 518.3 g溶于水，用EtOAc-H₂O(1:1，v/v)萃取，得EtOAc层和H₂O层萃取物分别为389.1 g和830.0 g，不溶性沉淀253.7 g。EtOAc层萃取物(150.0 g)经硅胶柱层析[CH₂Cl₂→CH₂Cl₂-MeOH(100:3→100:7，v/v)→CH₂Cl₂-MeOH-H₂O(10:3:1→7:3:1→6:3:1→6:4:1，下层，v/v)]，得到12个组分(Fr.1~Fr.12)。Fraction 5(2.8 g)经硅胶柱层析[CH₂Cl₂→CH₂Cl₂-MeOH(100:1→100:3→100:5→100:7，v/v)]，得到9个组分(Fr.5-1~Fr.5-9)。Fractions 5-3(117.0 mg)和5-4(263.5 mg)分别经制备型高效液相色谱法(PHPLC)分离制备[MeOH-H₂O(40:60，v/v)+ 1% HAc，5C₁₈-MS-Ⅱ柱]，得对羟基苯甲酸(1，5.6 mg)、原儿茶酸乙酯(4，8.0 mg)和对香豆酸(5，15.5 mg)。Fraction 6(2.9 g)经Sephadex LH-20凝胶柱层析[CH₂Cl₂-MeOH(1:1，v/v)]，得到7个组分(Fr.6-1~Fr.6-7)。Fraction 6-4(940.0 mg)经PHPLC分离制备[MeOH-H₂O(20:80，v/v)+ 1% HAc，5C₁₈-MS-Ⅱ柱]以及Sephadex LH-20柱层析(MeOH)纯化，得到原儿茶酸(2，147.0 mg)、儿茶素(6，439.2 mg)和表儿茶素(7，105.3 mg)。Fraction 6-5(396.2 mg)经Sephadex LH-20凝胶柱层析(MeOH)，得到5个组分(Fr.6-5-1~Fr.6-5-5)。Fraction 6-5-4(15.3 mg)经硅胶柱纯化[CH₂Cl₂-MeOH(100:3，v/v)]，得到槲皮素(9，5.2 mg)。Fraction 7(2.5 g)经ODS柱层析[MeOH-H₂O(20:80→30:70→40:60→50:50→60:40→70:30→80:20→100:0，v/v)]得到12个组分(Fr.7-1~Fr.7-12)。Fraction 7-7(113.2 mg)经Sephadex LH-20凝胶柱层析(MeOH)，得到5个组分(Fr.7-7-1~Fr.7-7-5)。Fraction 7-7-3(28.7 mg)经PHPLC分离制备[MeOH-H₂O(35:65，v/v)+ 1% HAc，5C₁₈-MS-Ⅱ柱]，得到rhodonidin A(8，11.0 mg)。Fraction 7-8(61.4 mg)经Sephadex LH-20凝胶柱层析(MeOH)和PHPLC分离制备[CH₃CN-H₂O(22:78，v/v)+ 1% HAc，5C₁₈-MS-Ⅱ柱]，得到异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(10，5.2 mg)和3′，5，7-trihydroxyisoflavone-4′-methoxy-3′-O-β-glucopyranoside(12，3.5 mg)。Fraction 9(5.0 g)经ODS柱层析[MeOH(10:90→20:80→30:70→40:60→50:50→60:40→70:30→100%，v/v)]，得到12个组分(Fr.9-1~Fr.9-12)。Fraction 9-6(1.1 g)经Sephadex LH-20凝胶柱层析(MeOH)和PHPLC分离制备[CH₃CN-H₂O(17:83，v/v)+ 1% HAc，5C₁₈-MS-Ⅱ柱]，得到原儿茶酸甲酯(3，2.6 mg)。Fraction 9-9(110.2 mg)经PHPLC分离制备[MeOH-H₂O(67:33，v/v)+ 1% HAc，PBr柱]，得到3个组分(Fr.9-9-1~Fr.9-9-3)。Fraction 9-9-3(25.5 mg)经PHPLC分离制备[CH₃CN-H₂O(22:78，v/v)+ 1% HAc，PBr柱]，得到异鼠李素-3-O-芸香糖苷(11，4.5 mg)。

3 结构鉴定 3.1 化合物1

白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 139.039 1[M+H]⁺ (calcd for C₇H₇O₃，139.039 0)，确定其分子式为C₇H₆O₃。¹H NMR(CD₃OD，500 MHz)谱数据：δ 7.87(2H，d，J=9.0 Hz，H-2，6)，6.81(2H，d，J=9.0 Hz，H-3，5)。¹³C NMR(CD₃OD，125 MHz)谱数据：δ 123.0(C-1)，133.0(C-2，6)，116.0(C-3，5)，163.0(C-4)，170.3(C-7)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[9]相对照，鉴定该化合物为对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid)。

3.2 化合物2

白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 153.019 1[M-H]^-(calcd for C₇H₅O₄，153.019 3)，确定其分子式为C₇H₆O₄。¹H NMR(CD₃OD，500 MHz)谱数据：δ 7.57(1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，6.90(1H，d，J=8.5 Hz，H-5)，7.54(1H，dd，J=2.0、8.5 Hz，H-6)。¹³C NMR(CD₃OD，125 MHz)谱数据：δ 123.1(C-1)，117.8(C-2)，145.9(C-3)，151.4(C-4)，116.0(C-5)，124.2(C-6)，170.7(C-7)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[10]相对照，鉴定该化合物为原儿茶酸(protocatechuic acid)。

3.3 化合物3

白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 169.049 5[M+H]⁺(calcd for C₈H₉O₄，169.049 5)，确定其分子式为C₈H₈O₄。¹H NMR(CD₃OD，500 MHz)谱数据：δ 7.42(1H，br.s，H-2)，6.80(1H，d，J=9.0 Hz，H-5)，7.40(1H，dd，J=2.0、7.5 Hz，H-6)，3.83(3H，s，7-OCH₃)。¹³C NMR(CD₃OD，125 MHz)谱数据：δ 122.6(C-1)，117.5(C-2)，146.3(C-3)，151.8(C-4)，115.9(C-5)，123.7(C-6)，168.9(C-7)，52.3(7-OCH₃)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[11]相对照，鉴定该化合物为原儿茶酸甲酯(protocatechuic acid methyl ester)。

3.4 化合物4

白色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 183.064 7[M+H]⁺(calcd for C₉H₁₁O₄，183.0652)，确定其分子式为C₉H₁₀O₄。¹H NMR(CD₃OD，500 MHz)谱数据：δ 7.42(1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，6.79(1H，d，J=8.5 Hz，H-5)，7.40(1H，dd，J=2.0、8.5 Hz，H-6)，4.29(2H，q，J=6.5 Hz，H₂-8)，1.35(3H，t，J=6.5 Hz，H3-9)。¹³C NMR(CD₃OD，125 MHz)谱数据：δ 122.9(C-1)，115.9(C-2)，146.2(C-3)，151.7(C-4)，117.4(C-5)，123.6(C-6)，168.5(C-7)，61.7(C-8)，14.7(C-9)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[12]相对照，鉴定该化合物为原儿茶酸乙酯(protocatechuic acid ethyl ester)。

3.5 化合物5

淡黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 165.053 8[M+H]⁺(calcd for C₉H₉O₃，165.054 6)，确定其分子式为C₉H₈O₃。¹H NMR(CD₃OD，500 MHz)谱数据：δ 7.44(2H，d，J=8.5 Hz，H-2，6)，6.81(2H，d，J=8.5 Hz，H-3，5)，7.60(¹H，d，J=16.0 Hz，H-7)，6.28(1H，d，J=16.0 Hz，H-8)。¹³C NMR(CD₃OD，125 MHz)谱数据：δ 127.3(C-1)，131.1(C-2，6)，116.8(C-3，5)，161.2(C-4)，146.6(C-7)，115.8(C-8)，171.2(C-9)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[13]相对照，鉴定该化合物为对香豆酸(p-coumaric acid)。

3.6 化合物6

淡黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 289.072 4[M-H]^-(calcd for C15H13O6，289.071 8)，确定其分子式为C₁₅H₁₄O₆。¹H NMR(CD₃OD，500 MHz)谱数据：δ 4.67(1H，d，J=7.5 Hz，H-2)，4.08(1H，m，H-3)，[2.61(1H，dd，J=8.0、16.0 Hz)，2.91(1H，dd，J=5.0、16.0 Hz)，H₂-4]，6.05(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.00(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.92(1H，d，J=1.5 Hz，H-2′)，6.83(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.77(1H，dd，J=1.5、8.0 Hz，H-6′)。¹³C NMR(CD₃OD，125 MHz)谱数据：δ 82.4(C-2)，68.5(C-3)，28.0(C-4)，157.2(C-5)，96.4(C-6)，157.1(C-7)95.7(C-8)，156.6(C-9)，101.0(C-10)，131.9(C-1′)，115.2(C-2′)，145.8(C-3′)，145.8(C-4′)，116.3(C-5′)，120.2(C-6′)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[14]相对照，鉴定该化合物为儿茶素(catechin)。

3.7 化合物7

淡黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 289.072 7[M-H]^-(calcd for C₁₅H₁₃O₆，289.071 8)，确定其分子式为C₁₅H₁₄O₆。1H NMR(CD₃OD，500 MHz)谱数据：δ 4.81(1H，br.s，H-2)，4.17(1H，m，H-3)，[2.74(1H，dd，J=3.0、17.0 Hz)，2.86(1H，dd，J=5.0、17.0 Hz)，H₂-4]，5.96(1H，d，J=1.5 Hz，H-6)，5.94(1H，d，J=1.5 Hz，H-8)，6.98(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.77(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)，6.80(1H，d，J=2.0、8.5 Hz，H-6′)。¹³C NMR(CD₃OD，125 MHz)谱数据：δ 79.8(C-2)，67.5(C-3)，29.2(C-4)，157.3(C-5)，96.5(C-6)，157.5(C-7)，96.0(C-8)，157.9(C-9)，100.1(C-10)，132.3(C-1′)，115.3(C-2′)，145.9(C-3′)，145.7(C-4′)，116.0(C-5′)，119.5(C-6′)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[15]相对照，鉴定该化合物为表儿茶素(epicatechin)。

3.8 化合物8

黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 575.120 7[M-H]^-(calcd for C₃₀H₂₃O12，575.119 5)，确定其分子式为C30H₂4O12。1H NMR(CD₃OD，500 MHz)谱数据：δ 3.96(1H，d，J=9.0 Hz，H-2)，3.99(1H，m，H-3)，[2.52(1H，dd，J=9.5、14.5 Hz)，2.95(1H，dd，J=6.0、14.5 Hz)，H₂-4]，5.90(1H，d，J=2.5 Hz，H-6)，5.54(1H，d，J=2.5 Hz，H-8)，[2.50(1H，d，J=11.5 Hz)，2.67(1H，d，J=11.5 Hz)，H₂-10]，6.42(1H，s，H-13)，4.92(1H，d，J=7.0 Hz，H-2′)，4.10(1H，m，H-3′)，[2.60(1H，dd，J=7.5、16.5 Hz)，2.85(1H，dd，J=5.5、16.5 Hz)，H₂-4′]，6.12(1H，s，H-6′)，6.84(1H，d，J=2.0 Hz，H-10′)，6.79(1H，d，J=8.5 Hz，H-13′)，6.74(1H，dd，J=2.0、8.5 Hz，H-14′)。¹³C NMR(CD₃OD，125 MHz)谱数据：δ 79.6(C-2)，66.9(C-3)，28.4(C-4)，100.5(C-4a)，157.7(C-5)，97.1(C-6)，158.1(C-7)95.9(C-8)，156.4(C-8a)，89.9(C-9)，46.0(C-10)，95.3(C-11)，194.1(C-12)，112.8(C-13)，164.4(C-14)，83.5(C-2′)，67.9(C-3′)，27.8(C-4′)，104.0(C-4′a)，166.3(C-5′)，91.0(C-6′)，168.1(C-7′)，105.6(C-8′)，155.2(C-8′a)，131.3(C-9′)，114.9(C-10′)，146.5(C-11′)，146.6(C-12′)，116.4(C-13′)，119.7(C-14′)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[16]相对照，鉴定该化合物为rhodonidin A，并结合2D NMR谱的解析，对文献中C-4和C-4′位之间的化学位移进行了调换。

3.9 化合物9

黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 303.051 2[M+H]⁺(calcd for C₁₅H₁₁O₇，303.049 9)，确定其分子式为C₁₅H₁₀O₇。¹H NMR(DMSO-d₆，500 MHz)谱数据：δ 6.19(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.41(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，7.67(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.89(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)，7.54(1H，d，J=2.0、8.5 Hz，H-6′)，12.50(1H，br.s，5-OH)。¹³C NMR(DMSO-d₆，125 MHz)谱数据：δ 146.7(C-2)，135.6(C-3)，175.7(C-4)，160.6(C-5)，98.1(C-6)，163.8(C-7)，93.3(C-8)，156.0(C-9)，102.9(C-10)，121.9(C-1′)，115.0(C-2′)，145.0(C-3′)，147.6(C-4′)，115.5(C-5′)，119.9(C-6′)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[17]相对照，鉴定该化合物为槲皮素(quercetin)。

3.10 化合物10

黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 477.105 0[M-H]^-(calcd for C22H₂1O12，477.103 8)，确定其分子式为C₂₂H₂₂O₁₂。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)谱数据：δ 6.20(1H，br.s，H-6)，6.43(1H，br.s，H-8)，7.94(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.91(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)，7.50(1H，dd，J=2.0、8.5 Hz，H-6′)，5.56(1H，d，J=7.0 Hz，H-1″)，3.23(1H，dd，J=7.0、7.0 Hz，H-2″)，3.25(1H，m，overlapped，H-3″)，3.11(1H，m，overlapped，H-4″)，3.11(1H，m，overlapped，H-5″)，[3.33(1H，m，overlapped)，3.59(1H，br.d，ca.J=12 Hz)，H₂-6″]，3.84(3H，s，3′-OCH₃)，12.60(1H，br.s，5-OH)。¹³C NMR(DMSO-d6，125 MHz)谱数据：δ 156.1(C-2)，132.9(C-3)，177.3(C-4)，161.1(C-5)，98.7(C-6)，164.5(C-7)93.7(C-8)，156.3(C-9)，103.8(C-10)，121.0(C-1′)，113.4(C-2′)，146.8(C-3′)，149.3(C-4′)，115.1(C-5′)，121.9(C-6′)，100.7(C-1″)，74.3(C-2″)，76.3(C-3″)，69.7(C-4″)，77.4(C-5″)，60.5(C-6″)，55.6(3′-OCH₃)。其₁H、¹³C NMR谱数据与文献[18]相对照，并结合2D NMR谱的解析，鉴定该化合物为异鼠李素3-O-β-D-葡萄糖苷(isorhamnetin-3-O-β-D-glucoside)。

3.11 化合物11

黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 623.163 0[M-H]^-(calcd for C₂₈H₃₁O₁₆，623.161 8)，确定其分子式为C₂₈H₃₂O₁₆。¹H NMR(DMSO-d₆，500 MHz)谱数据：δ 6.17(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.39(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，7.85(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.91(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)，7.51(1H，dd，J=2.0、8.5 Hz，H-6′)，5.43(1H，d，J=7.5 Hz，H-1″)，3.22(1H，dd，J=7.5、7.5 Hz，H-2″)，3.24(1H，dd，J=7.5、9.0 Hz，H-3″)，3.05(1H，dd，J=9.0、9.5 Hz，H-4″)，3.28(1H，m，H-5″)，[3.34(1H，dd，J=5.0、11.0 Hz)，3.71(1H，br.d，ca.J=11 Hz)，H₂-6″]，4.42(1H，d，J=1.5 Hz，H-1″′)，3.40(1H，dd，J=1.5、3.5 Hz，H-2″′)，3.26(1H，dd，J=3.5、9.5 Hz，H-3″′)，3.08(1H，dd，J=9.0、9.5 Hz，H-4″′)，3.27(1H，m，H-5″′)，0.98(3H，d，J=6.0 Hz，H₃-6″′)，3.83(3H，s，3′-OCH₃)，12.57(1H，br.s，5-OH)。¹³C NMR(DMSO-d₆，125 MHz)谱数据：δ 156.4(C-2)，132.8(C-3)，177.0(C-4)，161.0(C-5)，98.9(C-6)，164.2(C-7)，93.8(C-8)，156.2(C-9)，103.9(C-10)，120.9(C-1′)，113.1(C-2′)，146.7(C-3′)，149.3(C-4′)，115.1(C-5′)，122.1(C-6′)，101.2(C-1″)，74.2(C-2″)，76.3(C-3″)，70.0(C-4″)，75.8(C-5″)，66.7(C-6″)，100.8(C-1″′)，70.2(C-2″′)，70.5(C-3″′)，71.7(C-4″′)，68.2(C-5″′)，17.6(C-6″′)，55.5(3′-OCH₃)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[19]相对照，并结合2D NMR谱的解析，鉴定该化合物为异鼠李素-3-O-芸香糖苷(isorhamnetin-3-O-rutinoside)。

3.12 化合物12

黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 485.107 0[M+Na]⁺(calcd for C₂₂H₂₂O₁₁Na，485.105 4)，确定其分子式为C₂₂H₂₂O₁₁。¹H NMR(CD₃OD，500 MHz)谱数据：δ 8.11(1H，s，H-2)，6.21(1H，br.s，H-6)，6.32(1H，br.s，H-8)，7.39(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，7.06(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)，7.22(1H，dd，J=2.0、8.5 Hz，H-6′)，4.96(1H，d，J=7.5 Hz，H-1″)，3.52(1H，dd，J=7.5、9.5 Hz，H-2″)，3.48(1H，dd，J=8.5、9.5 Hz，H-3″)，3.38(1H，dd，J=8.5、9.0 Hz，H-4″)，3.43(1H，m，H-5″)，[3.68(1H，dd，J=6.0、12.0 Hz)，3.90(1H，dd，J=2.0、12.0 Hz)，H₂-6″]，3.90(3H，s，4′-OCH₃)。¹³C NMR(CD₃OD，125 MHz)谱数据：δ 155.3(C-2)，124.9(C-3)，181.9(C-4)，159.2(C-5)，100.2(C-6)，166.7(C-7)，95.1(C-8)，158.2(C-9)，106.0(C-10)，125.4(C-1′)，119.2(C-2′)，147.7(C-3′)，151.0(C-4′)，113.6(C-5′)，124.1(C-6′)，102.8(C-1″)，75.0(C-2″)，77.9(C-3″)，71.6(C-4″)，78.3(C-5″)，62.7(C-6″)，56.8(4′-OCH₃)。其¹H、¹³C NMR谱数据与文献[20]相对照，并结合2D NMR谱的解析，鉴定该化合物为3′，5，7-trihydroxyisoflavone-4′-methoxy-3′-O-β-glucopyranoside。

4 结果与讨论

花生衣产量大，价格低廉，但目前多作为饲料和燃料等低附加值产品使用，利用率低。加大对花生衣的研究和应用，可以提高花生的综合利用价值和经济价值，对促进中国食品工业的发展、增强人们的身体健康有重要的现实意义。笔者通过对花生衣的化学成分的研究，为其综合开发利用提供了实验依据。在此过程中，从花生衣50%乙醇提取物中鉴定了12个单体成分。其中化合物8为首次从落花生属中分离得到，化合物3为首次从该植物中分离得到。