火麻仁为桑科植物大麻（Cannabis sativa L.）的干燥成熟果实，具有补中益气、润肠去燥的功效，临床上常与其他润下药配合治疗肠燥便秘，其馏油也用于治疗神经性皮炎和慢性湿疹^[1]。现代研究表明火麻仁还具有抗炎、抗氧化活性、调节脂质代谢、降低血压，抗衰老、心肌损伤保护等多重药理作用^[2]。

炒火麻仁是《中华人民共和国药典》收载的常见炮制品，且临床多以炒火麻仁入药。目前对于火麻仁的炮制机制并不清晰，有学者认为火麻仁炒黄后会降低毒性，增强滋脾润燥的功效^[3]；也有学者认为火麻仁炒后会使脂肪酸和挥发油消失殆尽，变为香燥之品，不利于治疗便秘^[4]。

挥发油是中药中的一类重要活性物质，具有解表、行气、化湿、开窍的作用^[5]。但目前对火麻仁炮制后挥发油的成分及药效变化尚不清楚。本实验采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术对炮制前、后火麻仁挥发油的化学成分进行分析，研究相关成分的量变和质变规律，拟为进一步阐明火麻仁炮制机制、制定炮制标准和指导临床合理用药奠定基础。

1 仪器与药材 1.1 仪器

Gas Chromatograph Clarus 680-Mass Spectrometer Clarus SQ 8T型气质联用仪（EI源，美国PE公司），98-1-BN型电子调温电热套（天津市泰斯特仪器有限公司），YP202N型电子天平（上海精密科学仪器有限公司）。

1.2 药材与试剂

石油醚60~90 ℃（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司），水为超纯水。

火麻仁购自河北安国药材市场，产地为安徽省，经黑龙江省中医药科学院王伟明研究员鉴定为桑科植物大麻（Cannabis sativa L.）的干燥成熟果实。

丁香酚对照品（批号725-200209，中国药品生物制品检定所，纯度≥98.0%）。

2 方法 2.1 样品制备

按2020年版《中华人民共和国药典》清炒法（通则0213）将火麻仁炒至微黄，有香气，得炒火麻仁。再将火麻仁生品和炒品研碎，过20目筛，备用。

2.2 挥发油提取

取样品粉末100 g，精密称定，置于2 000 mL圆底烧瓶中，加水1 000 mL后放置1 h，按2020年版《中华人民共和国药典》四部通则挥发油测定法（甲法）操作，提取8 h。收集挥发油，称质量，火麻仁生品与炒品各平行测定3次，计算挥发油得率。再转移至10 mL容量瓶中，用石油醚定容至刻度，摇匀，得样品储备液。

2.3 内标溶液制备

取丁香酚对照品适量，加石油醚配制成30 μg/mL的内标溶液。

2.4 供试品溶液制备

精密量取5 mL样品储备液，置于10 mL容量瓶中，精密加入1 mL内标溶液，用石油醚稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得。

2.5 测试条件

色谱条件：Elite-5MS毛细管色谱柱（0.32 mm×60 m，0.25 μm），载气为氦气，体积流量为1.0 mL/min，进样口温度为220 ℃，进样量为1 μL，分流比为10∶1，程序升温：初始70 ℃，保持3 min，再以3 ℃/min的速度升至180 ℃，最后以7 ℃/min的速度升至220 ℃，保持10 min。

质谱条件：接口温度250 ℃，电离方式为电子轰击电离，电离能量为70 eV，离子源温度为250 ℃，采集方式为MS Scan，扫描质量范围为40~450 m/z，扫描时间为5.80~55.38 min，NIST谱图检索。

2.6 数据处理 2.6.1 化学成分鉴定

吸取供试品溶液，按上述“2.5”项条件进行测定，记录色谱图。数据经NIST谱库检索，以正反匹配度大于800为筛选条件并结和文献报道的二级质谱信息，对色谱峰进行定性分析；利用化合物与内标物丁香酚的峰面积之比计算各成分的相对含量。

2.6.2 差异性成分筛选

将获得的样品数据导入EZinfo 3.0.3软件进行正交偏最小二乘判别（OPLS-DA）分析，结合变量权重重要性排序（VIP）值＞1.0筛选出火麻仁炮制前后的差异化合物；将获得的样品数据导入IBM SPSS Statistics 25.0软件进行配对t检验分析，结合P < 0.05筛选出火麻仁炮制前后含量变化具有统计学意义的化学成分；将上述两者结合筛选出显著性差异化合物。

3 结果 3.1 化学成分鉴定

将供试品溶液按“2.5”项下的GC-MS条件进行测定，得到火麻仁炮制前和炮制后挥发油的GC-MS总离子流图。色谱信息经NIST谱库检索和文献检索，从火麻仁生品挥发油中鉴定出40种化合物，从火麻仁炮制品挥发油中鉴定出36种化合物，见表 1及图 1。

3.2 差异性成分筛选

对火麻仁炮制前后的成分信息进行OPLS-DA分析，生成得分（Scores）图、散点（S-Plot）图和VIP图，见图 2、图 3、图 4。

Scores图显示生品分布在第二、三象限，炮制品分布在第一、四象限，说明火麻仁生品和炮制品被分为两类，存在明显的质量差异。S-Plot图中X轴表示变量的贡献值，Y轴表示变量的可信度，每个点代表 1个化合物，与原点距离越远的点，所代表的化合物对两组样品间的差异贡献越大。按各成分对样品分类的影响大小进行排序，获得12个VIP值＞1.0的化学成分，作为差异性成分。进一步筛选P < 0.05的化学成分，得到11个具有统计学意义的差异性成分，其中正己醛、2-戊基呋喃、茴香脑、反，反-2，4-癸二烯醛的含量在炮制后增加，β-榄香烯、α-法呢烯、Δ-杜松烯、芳姜黄酮、植酮、棕榈酸甲酯、亚麻酸甲酯的含量在炮制后降低。

4 讨论

本研究利用GC-MS技术从火麻仁生品挥发油中鉴定出40种成分，从炮制品中鉴定出36种成分。所得数据经进一步的处理与分析，获得正己醛、2-戊基呋喃、茴香脑、反，反-2，4-癸二烯醛、β-榄香烯、α-法呢烯、Δ-杜松烯、芳姜黄酮、植酮、棕榈酸甲酯、亚麻酸甲酯11个显著性差异化合物，其中2-戊基呋喃、茴香脑为清炒后新检测到的化合物，β-榄香烯、Δ-杜松烯、芳姜黄酮、植酮为清炒后消失的化合物。

脂肪酸是火麻仁中的主要成分，易氧化降解生成氢过氧化物和醛类物质。研究表明，亚油酸会自动氧化生成C₉-和C₁₃-的氢过氧化物，C₁₃-的氢过氧化物很不稳定，在温度超过150 ℃时易裂解生成己醛；C₉-的氢过氧化物则会裂解生成2，4-癸二烯醛^[6-7]。火麻仁经炒制后，正己醛、2-戊基呋喃、反，反-2，4-癸二烯醛等脂肪酸氧化降解产物的含量增加。

据报道，本实验获得的显著性差异化合物β-榄香烯和芳姜黄酮具有抗肿瘤活性^[8-9]，植酮具有清除1，1-二苯基-2-苦味酰基（DPPH）自由基、抗炎等作用^[10]，需要进一步与药效学实验结合，以探讨火麻仁的炮制机制和炮制标准。