2026, Vol. 45文章信息
- 陈博乐, 王海腾, 李宇童, 李金帅, 房纬
- CHEN Bole, WANG Haiteng, LI Yutong, LI Jinshuai, FANG Wei
- TRPV4/NF-κB信号通路探讨点按承山穴调控脊髓胶质细胞活性干预CCD大鼠的镇痛机制研究
- Exploring the analgesic mechanism of acupoint pressure at Chengshan(BL57)on CCD rats via modulating spinal glial cell activity based on the TRPV4/NF-κB signaling pathway
- 天津中医药大学学报, 2026, 45(3): 317-326
- Journal of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, 2026, 45(3): 317-326
- http://dx.doi.org/10.11656/j.issn.1673-9043.2026.03.09
-
文章历史
收稿日期: 2025-10-20
引用本文 |
2. 天津中医药大学, 天津 301617;
3. 国家中医药管理局推拿手法生物效应三级实验室, 天津 300193
2. Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 301617, China;
3. The Third Level Laboratory of Biological Effects of Tuina Techniques, National Administration of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China
神经病理性疼痛（NP）是指因躯体感觉神经系统损伤或出现疾病导致的疼痛，主要表现特点为自发性疼痛、痛觉过敏和感觉异常等[1]。流行病学研究表明，全球约6.9%~10.0% 的人患有NP[2]。疼痛不仅能引起运动和感觉功能障碍，长期慢性疼痛还会导致焦虑、抑郁以及记忆力下降等，给患者的日常活动造成了诸多麻烦，使其生活质量发生明显下降。其最常用的治疗方法为药物治疗，包括抗癫痫药物（如加巴喷丁和普瑞巴林）、三环类抗抑郁药物（如阿米替林）、阿片类药物（如吗啡、羟考酮）等，但药物的总体治疗效果仍不理想，且伴有不同程度的不良反应[3]。而推拿镇痛具有效果好、经济安全、副作用少等优势[4]，其中点按法由于接触面积小，有较好的深透性，具有疏筋活络止痛、调节脏腑功能等功效，可广泛应用于全身各个部位[5]，特别是对肌肉或骨缝深处的旧伤或顽痹之痛点，有明显“以痛止痛”的作用[6]。
近年来，基于脊神经结扎与背根神经节持续压迫（CCD）等动物模型的研究，逐步揭示了推拿缓解NP的分子机制，包括抑制炎症反应、调节神经递质平衡、调控离子通道活性及信号通路等。而在外周伤害性信息会传导至大脑高级中枢，在对此过程进行调节与整合方面，脊髓背角起到第一中枢作用，其中的神经胶质细胞活化和痛觉中枢敏化存在联系。但现有研究未对胶质细胞深入研究。故本研究以胶质细胞为核心靶点对推拿镇痛机制进行研究。
瞬时受体电位香草素受体4型通道蛋白（TRPV4）是大鼠背根神经节（DRG）上的机械感受器，能够传导伤害性机械信号。有研究表明[7]给CCD模型大鼠鞘内注射TRPV4siRNA，调节细胞内钙离子（Ca2+）浓度，可显著减弱大鼠的行为性痛觉过敏发应和DRG中核转录因子-κB（NF-κB）的活性。经TRPV4催化剂预处理的CCD大鼠模型，体内NF-（B抑制剂的抑制作用减弱[8]。这些研究说明TRPV4信号通路可能通过调节细胞内Ca2+浓度及NF-κB活性，参与CCD诱发的神经性痛觉过敏及热觉过敏发应。大量研究证实，脊髓背角的突出可塑性驱动疼痛信号的传导，是神经病理痛产生与维持的重要机制[9]，而胶质细胞能够积极的与突触接触，调节突触可塑性，改善神经病理痛。基于此，研究拟观察推拿对CCD大鼠模型的镇痛效应，分析推拿镇痛与TRPV4/NF-κB影响脊髓胶质细胞活性的相关性，揭示推拿镇痛新靶点。
1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 实验动物由斯贝福（北京）生物技术有限公司提供的无特定病原体（SPF）级健康雄性SD大鼠36只，6~8周，体质量180~200 g。由实验动物中心进行动物饲养，正式实验前，对大鼠进行分笼适应性喂养1周，每笼4只，自由饮食，温度控制在（25±2）℃，湿度控制在40%~70% 之间，房内光照时间固定为每天12 h。实验动物方案获得天津市南开医院实验动物伦理委员会批准，伦理批准号：NKYY-DWLL-2024-088。
1.1.2 实验试剂戊巴比妥（货号：57330）；青霉素钠（规格：每只160万单位）；4% 多聚甲醛（规格：500 mL）；BCA蛋白定量试剂盒（货号：PC0020）；IL-1β、TNF-α酶联免疫测定试剂盒（货号：MM-0047R2、MM-0180R2）；蛋白酶抑制剂（货号：A32963）；Goat Anti Rabbit IgG/HRP（货号：S2001）。
1.1.3 实验仪器冷热板测痛仪（型号：KW-LB，南京卡尔文）；大小鼠足底测痛仪（型号：KW-CT，南京卡尔文）；台式高速冷冻型微量离心机（型号：CF1524R，赛洛捷克）；电泳槽（型号：JY-ZY5，北京君意）；摇床（型号：HNY-902H，天津欧诺）；酶标仪（型号：800TS，美国Bio Tek Instruments）；荧光化学发光凝胶成像系统（型号：3300 Mini，上海勤翔）。
1.2 实验方法 1.2.1 实验分组36只SD大鼠适应性喂养7 d后，采用随机数字表法分为空白组、CCD模型组和推拿组，每组12只，每组根据取材时间再分为7 d组、11 d组和18 d组。
1.2.2 造模方法参照文献[10]方法建立CCD模型：术前大鼠禁食8 h，不禁水。腹腔注射巴比妥钠（40 mg/kg）麻醉大鼠，大鼠腰骶部剃毛、消毒并铺无菌洞巾。大鼠骶髂连线中点右侧切开皮肤，向上延长2~4 cm，找到L4-L5棘突，用弯血管钳缓慢分离皮下筋膜组织，此时肌肉暴露，钝性分离腰最长肌、多裂肌与背半棘肌，分离肌肉后，暴露L4-L5椎间外孔，然后将一根L形细针（直径0.6 mm）插入L5椎间孔约4 mm处，与背中线成约30°角，与椎体水平线成10°角。当针尖到达DRG时，手术侧的后腿肌肉表现出轻微、短暂的抽搐。然后，将针头从L5椎间孔中拔出，并将一根长4 mm、直径0.45 mm的不锈钢棒沿针头路径插入L5椎间孔。调整椎旁肌肉使钢棒固定，用生理盐水反复冲洗手术局部，依次用4-0丝线缝合肌肉、腰背筋膜及皮肤。腹腔注射青霉素连续3 d，预防感染。术后密切观察大鼠生命体征变化，做好大鼠保暖工作，防止大鼠低体温，待大鼠清醒且生命体征平稳后，送回动物室饲养。
1.2.3 推拿干预推拿组在造模后第4天开始进行推拿点按手法干预。
1.2.3.1 大鼠制动为方便推拿清醒状态下的大鼠，采用自制固定器将大鼠固定。
1.2.3.2 推拿部位选择选取大鼠右侧承山穴作为推拿部位。
1.2.3.3 推拿干预方法将大鼠置于自制固定器内5 min，适应环境。拇指带上自主研制适用于大鼠推拿的指套装置，有节律的点按小腿右侧承山穴，压力为5牛顿，频率120次/min，每次15 min，连续干预14 d。
空白组和CCD模型组不进行任何推拿干预，仅做和推拿组相同时间的固定。
1.2.4 疼痛行为学检测分别于造模后第7、11、18天对各组大鼠进行热缩足潜伏期（PWL）和机械刺激缩足阈值（PWT）测定。
1.2.4.1 PWL测定设定板面温度为55 ℃，将大鼠放入测试仪器中使下肢足底接触冷热板，踩下踏板开始计时，当大鼠右足出现爪缩、抖动或跳跃等痛觉反应时再次踩下踏板停止计时。每只大鼠连续测量3次，测量时每次间隔5 min。
1.2.4.2 PWT测定将大鼠放入测试仪器15 min适应环境，手持固定刻度的测痛传感器刺激大鼠足底部第3、4趾间皮肤，当大鼠出现舔足或缩爪反应，记录此时g值。连续记录5次，测量时每次间隔5 min。
1.2.5 取材方法术后第7、11、18天，大鼠行为学测量后，各组大鼠分别随机处死4只大鼠取材。腹腔注射25% 乌拉坦麻醉大鼠，取大鼠脊髓的腰膨大部位，一部分置于-80 ℃冰箱保存，用作蛋白质免疫印迹检测和酶联免疫吸附实验。另一部分置于多聚甲醛中浸泡8~10 h，将固定好的脊髓标本依次在10%、20%、30% 蔗糖溶液于4 ℃进行梯度脱水，将组织竖直放于提前制作、修平的OCT底座上，切片，厚度30~35 μm，然后将切片转移至切片保护液中，-80 ℃冰箱保存，用作免疫荧光检测。
1.2.6 免疫荧光法检测脊髓胶质细胞活化程度取脊髓组织，切片，漂洗，使用驴血清抗体室温封闭2 h。一抗孵育4 ℃过夜，漂洗，二抗铝皮饭盒避光室温孵育2 h，漂洗。封片，使用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜进行图片采集。
1.2.7 蛋白免疫印迹法（Western blot）检测TRPV4、NF-κB蛋白表达量取脊髓组织，使用裂解液对组织进行裂解，离心取上清液。使用BCA蛋白浓度定量试剂盒测蛋白浓度并计算上样量，95~100 ℃，煮沸，使蛋白变性，电泳，转膜，封闭1.5 h。一抗孵育4 ℃过夜，二抗室温下于摇床孵育2 h。洗膜后将条带置于荧光化学发光凝胶成像系统，成像得到图片。
1.2.8 ELISA检测IL-1β和TNF-α表达情况将组织样本研磨、裂解、离心，随后取上清液并进行BCA定量。严格参照ELISA试剂盒说明书操作。采用酶标仪于450 nm处测量OD值，根据说明书提供的软件ELISA Calc绘制四参数逻辑函数的标准曲线并计算出IL-1β和TNF-α浓度。
1.3 统计学方法应用SPSS 26.0统计软件分析，实验数值均以均数±标准差（x±s）表示。首先按分组对数据进行正态性检验，数据满足正态分布后，两组数据采用配对T检验，多组选择单因素方差分析（ANOVA），检验方差齐性，方差齐时，选择LSD检验；方差不齐时，选择Dunnett’s T3检验。若数值为偏态分布，选择非参数检验。以P＜0.05为有统计学差异，P＜0.01为有显著统计学差异。
2 结果 2.1 推拿对CCD大鼠行为学的影响 2.1.1 推拿对CCD大鼠足底热痛阈的影响根据 表 1所示，造模后第7天各组PWL值显示：与空白组相比，CCD模型组PWL值显著降低（P＜0.01）；与CCD模型组相比，推拿组PWL值无差异（P>0.05）。造模后第11天各组PWL值显示：与空白组相比，CCD模型组PWL值显著降低（P＜0.01）；与CCD模型组相比，推拿组PWL值升高（P＜0.05）。18 d组PWL值显示：与空白组相比，CCD模型组PWL值显著降低（P＜0.01）；与CCD模型组相比，推拿组PWL值显著升高（P＜0.01）。
| s | |||||||||||||||||||||||||||||
| 组别 | 动物数 | 造模后第7天 | 造模后第11天 | 造模后第18天 | |||||||||||||||||||||||||
| 空白组 | 4 | 15.68±0.64 | 16.08±0.53 | 14.97±0.52 | |||||||||||||||||||||||||
| CCD模型组 | 4 | 7.32±1.06** | 8.27±0.27** | 10.98±0.38** | |||||||||||||||||||||||||
| 推拿组 | 4 | 9.37±0.98 | 11.14±0.68# | 14.14±0.35## | |||||||||||||||||||||||||
| 注：与空白组比较，**P＜0.01；与CCD模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。 | |||||||||||||||||||||||||||||
根据 表 2所示，7 d组大鼠PWT值显示：与空白组相比，CCD模型组PWT值显著降低（P＜0.01）；与CCD模型组相比，推拿组PWT值显著升高（P＜0.01）。11 d组PWT值显示：与空白组相比，CCD模型组PWT值显著降低（P＜0.01）；与CCD模型组相比，推拿组PWT值显著升高（P＜0.01）。18 d组PWT值显示：与空白组相比，CCD模型组PWT值显著降低（P＜0.01）；与CCD模型组相比，推拿组PWT值显著升高（P＜0.01）。
| g | |||||||||||||||||||||||||||||
| 组别 | 动物数 | 造模后第7天 | 造模后第11天 | 造模后第18天 | |||||||||||||||||||||||||
| 空白组 | 4 | 37.83±0.92 | 38.16±0.73 | 38.53±0.31 | |||||||||||||||||||||||||
| CCD模型组 | 4 | 18.78±0.18** | 21.89±0.98** | 26.79±1.63** | |||||||||||||||||||||||||
| 推拿组 | 4 | 24.61±0.27## | 28.46±0.56## | 36.88±0.57## | |||||||||||||||||||||||||
| 注：与空白组比较，**P＜0.01；与CCD模型组比较，##P＜0.01。 | |||||||||||||||||||||||||||||
根据图 1、图 2、图 3、表 3、表 4所示，与空白组相比，造模后第7、11、18天CCD模型组TRPV4蛋白含量均显著升高（P＜0.01）；与CCD模型组相比，7 d推拿组TRPV4蛋白含量无差异（P>0.05），11 d和18 d推拿组TRPV4蛋白含量均显著降低（P＜0.01）。与空白组相比，7 d、11 d、18 d CCD模型组NF-κB蛋白含量显著升高（P＜0.01）；与CCD模型组相比，7 d推拿组NF-κB蛋白含量无差异（P>0.05），11 d和18 d NF- κB蛋白含量降低（P＜0.05）。
|
| 图 1 造模后第7天各组TRPV4、NF-κB蛋白表达图 |
|
| 图 2 造模后第11天各组TRPV4、NF-κB蛋白表达图 |
|
| 图 3 造模后第18天各组TRPV4、NF-κB蛋白表达图 |
| % | |||||||||||||||||||||||||||||
| 组别 | 动物数 | 造模后第7天 | 造模后第11天 | 造模后第18天 | |||||||||||||||||||||||||
| 空白组 | 4 | 0.46±0.03 | 0.44±0.02 | 0.45±0.03 | |||||||||||||||||||||||||
| CCD模型组 | 4 | 0.97±0.05** | 0.89±0.03** | 0.76±0.03** | |||||||||||||||||||||||||
| 推拿组 | 4 | 0.94±0.04 | 0.68±0.05## | 0.49±0.01## | |||||||||||||||||||||||||
| 注：与空白组比较，**P＜0.01，与CCD模型组比较，##P＜0.01。 | |||||||||||||||||||||||||||||
| % | |||||||||||||||||||||||||||||
| 组别 | 动物数 | 造模后第7天 | 造模后第11天 | 造模后第18天 | |||||||||||||||||||||||||
| 空白组 | 4 | 0.86±0.04 | 0.81±0.03 | 0.78±0.03 | |||||||||||||||||||||||||
| CCD模型组 | 4 | 1.19±0.06** | 1.01±0.07** | 0.96±0.06** | |||||||||||||||||||||||||
| 推拿组 | 4 | 1.16±0.03 | 0.92±0.03# | 0.84±0.04# | |||||||||||||||||||||||||
| 注：与空白组比较，**P＜0.01；与CCD模型组比较，#P＜0.05。 | |||||||||||||||||||||||||||||
根据表 5、图 4、图 5、图 6所示，与空白组相比，7 d、11 d和18 d CCD模型组IBA1、GFAP荧光强度均显著升高（P＜0.01）；与CCD模型组相比，7 d、11 d和18 d推拿组IBA1、GFAP荧光强度均显著降低（P＜0.01）。
| 组别 | 动物数 | 造模后第7天 | 造模后第11天 | 造模后第18天 |
| 空白组 | 4 | 6.07±1.32 | 5.11±0.45 | 5.06±0.87 |
| CCD模型组 | 4 | 34.06±3.54** | 28.71±0.84** | 21.79±1.19** |
| 推拿组 | 4 | 29.59±0.69## | 21.59±0.77## | 11.24±0.36## |
| 注：与空白组比较，**P＜0.01；与CCD模型组比较，##P＜0.01。 | ||||
|
| 图 4 造模后第7天各组IBA1表达图（×400） |
|
| 图 5 造模后第11天各组IBA1表达图（×400） |
|
| 图 6 造模后第18天各组IBA1表达图（×400） |
根据表 6、图 7、图 8、图 9所示，与空白组相比，造模后第7、11、18 d CCD模型组GFAP荧光强度均显著升高（P＜0.01）；与CCD模型组相比，7、11、18 d推拿组GFAP荧光强度均显著降低（P＜0.01）。
| 组别 | 动物数 | 造模后第7天 | 造模后第11天 | 造模后第18天 |
| 空白组 | 4 | 9.84±0.53 | 9.62±0.28 | 9.58±0.18 |
| CCD模型组 | 4 | 21.34±0.57** | 17.80±0.53** | 15.84±0.26** |
| 推拿组 | 4 | 20.07±0.31## | 15.63±0.24## | 11.71±0.41## |
| 注：与空白组比较，**P＜0.01；与CCD模型组比较，##P＜0.01。 | ||||
|
| 图 7 造模后第7天各组GFAP表达图（×400） |
|
| 图 8 造模后第11天各组GFAP表达图（×400） |
|
| 图 9 造模后第18天各组GFAP表达图（×400） |
根据表 7所示，与空白组相比，7 d、11 d和18 d CCD模型组TNF-α蛋白含量均显著升高（P＜0.01）；与CCD模型组相比，7 d推拿组TNF-α蛋白含量降低（P＜0.05），11 d和18 d蛋白含量显著降低（P＜0.01）。
| pg/mg | |||||||||||||||||||||||||||||
| 组别 | 动物数 | 造模后第7天 | 造模后第11天 | 造模后第18天 | |||||||||||||||||||||||||
| 空白组 | 4 | 34.23±2.67 | 37.49±1.67 | 38.91±1.72 | |||||||||||||||||||||||||
| CCD模型组 | 4 | 116.45±3.73** | 106.62±4.15** | 99.23±3.78** | |||||||||||||||||||||||||
| 推拿组 | 4 | 107.52±2.06# | 89.54±2.57## | 67.46±3.24## | |||||||||||||||||||||||||
| 注：与空白组比较，**P＜0.01；与CCD模型组比较，##P＜0.01；与CCD模型组比较，#P＜0.05。 | |||||||||||||||||||||||||||||
根据表 8所示，与空白组相比，7 d、11 d和18 d CCD模型组IL-1β蛋白水平均显著升高（P＜0.01）；与CCD模型组相比，7 d、11 d和18 d推拿组IL-1β蛋白水平均大幅下调（P＜0.01）。
| pg/mg | |||||||||||||||||||||||||||||
| 组别 | 动物数 | 造模后第7天 | 造模后第11天 | 造模后第18天 | |||||||||||||||||||||||||
| 空白组 | 4 | 10.17±0.78 | 9.27±1.59 | 10.67±2.53 | |||||||||||||||||||||||||
| CCD模型组 | 4 | 122.21±10.34** | 100.63±8.52** | 87.66±4.08** | |||||||||||||||||||||||||
| 推拿组 | 4 | 93.51±4.59## | 66.78±3.24## | 35.19±2.98## | |||||||||||||||||||||||||
| 注：与空白组比较，**P＜0.01；与CCD模型组比较，##P＜0.01。 | |||||||||||||||||||||||||||||
NP被国际疼痛协会定义为：躯体感觉神经系统出现病变或相关疾病所致的一类疼痛[11]，临床常表现为烧灼样、电击样、针刺样的自发痛以及疼痛区域的感觉异常[12]。该疾病严重影响患者生活质量，但是由于目前NP发病机制尚未明确，故缺少有效治疗方法[13-14]。脊髓背角是外周伤害性信息在向大脑高级中枢传导过程中调节和整合的第一中枢，其中的神经胶质细胞（主要指星形胶质细胞和小胶质细胞）的活化参与痛觉中枢敏化[15]。有研究表明，活化的胶质细胞释放多种细胞因子，促进伤害感受信号级联反应的发生，从而提高了神经元的兴奋性，引起中枢敏化，导致疼痛的产生与维持[16]。Garrision团队进一步探索发现，星形胶质细胞活化程度标记分子GFAP的表达水平与痛觉敏化程度呈显著正相关性[17]。另有研究发现[18]，在周围神经损伤后，激活的小胶质细胞会降解脊髓背角I层的细胞外基质结构—神经周围网，进而增强投射神经元的活性，诱发痛觉。因此，星形胶质细胞和小胶质细胞的活化在诱导和维持NP过程中发挥关键作用。
CCD模型可模拟DRG或神经根受压或继发炎症所致的坐骨神经痛。术后1 d大鼠即出现行为学改变，表现为机械痛过敏和热痛过敏，可持续6~8周[19]。TRPV4是一种非选择性阳离子通道，具有机械敏感性，在生物体许多组织、器官中均有表达[20]。有研究表明[21]，TRPV4也是DRG内一种重要的温度伤害性感受器，在热痛觉过敏中起着至关重要的作用。另有研究发现[22]，在NP和炎性疼痛等不同的病理状态下，TRPV4可介导多种原因导致的机械和热痛敏。NF-κB是基因转录的调控因子，有研究表明[23-24]，NF-κB通过参与神经系统炎症反应、神经细胞凋亡、突出重塑影响NP。用RNAi的方法下调胶质细胞中TRPV4的表达，或者用TRPV4抑制剂处理胶质细胞，能够抑制胶质细胞释放IL-1β和TNF-α[25]。说明TRPV4可能参与了胶质细胞的激活。NF-κB在小胶质细胞激活中起着至关重要的作用，活化的小胶质细胞能够通过NF-κB信号通路介导神经炎症[26]。因此，脊髓背角TRPV4/NF-κB信号通路的活化在激活胶质细胞引起痛觉异常中起到了重要作用。
中医推拿在镇痛方面能够实现突出效果，用于神经根型颈椎病（CSR）[27]、LDH[28]和坐骨神经痛[29]等治疗，临床效果良好。推拿以“通则不痛”为治疗原则，其手法作用于经络腧穴，可以通过疏通经络、行气活血达到止痛的作用[30]。承山作为膀胱经上重要的交通枢纽，是经脉阳气汇聚之所，也是肌肉运动的关键连接，调节此穴可促进经脉之气流通，缓解经脉瘀滞引起的痛症，如腰腿痛、转筋、下肢痿痹等[31]。Wu等[32]发现，承山穴和坐骨神经之间通过感觉和运动通路相关联，它们分布在相同的脊柱节段和中枢靶区。通过力敏腧穴探查发现，承山穴是腰痛患者的力敏穴位之一，承山穴的力敏阈值也随治疗过程中病情的缓解而逐渐升高[33]。
本研究结果显示，造模后大鼠术侧后肢热痛阈和机械痛阈显著降低，推拿干预可以缓解模型大鼠的疼痛症状，干预时间越长，镇痛效果越明显。进一步检测发现模型大鼠脊髓背角TRPV4和NF-κB表达显著升高，并引起小胶质细胞、星形胶质细胞表达升高，导致炎症因子TNF-α、IL-1β蛋白表达显著升高。术后第7 d，TRPV4、NF-κB的表达水平最高，随后逐渐下降，与孟宪国等[34]研究结果相同。而推拿干预后，TRPV4、NF-κB的表达被显著抑制，小胶质细胞、星形胶质细胞、TNF-α、IL-1β表达也显著降低，且该抑制作用随推拿干预时间延长逐渐增强，提示推拿可能通过机械刺激直接或间接调控TRPV4/NF-κB信号通路，抑制胶质细胞活化，降低TNF-α、IL-1β表达，从而减轻神经炎症达到镇痛作用。
综上所述，推拿承山穴可通过抑制TRPV4/NF- κB信号通路，减少脊髓胶质细胞活化，从而抑制TNF-α、IL-1β等炎性因子释放，从而缓解CCD大鼠的神经病理性疼痛。且在为期14 d的推拿治疗中，推拿干预时间越长，镇痛效果越明显。
尽管本研究初步揭示了推拿手法通过调控TRPV4/NF-κB信号通路抑制脊髓胶质细胞活化进而缓解CCD大鼠神经病理性疼痛的机制，但未涉及不同推拿刺激参数的对比，且未探讨胶质细胞极化（M1/M2型）的具体变化。未来可进行不同参数对比并细化胶质细胞极化情况进一步深入研究，研究需要明确量化作用于体表的压力值，而非仅用“轻” “中”“重”等主观描述。需探索不同压力水平（如低、中、高，或设定具体压力梯度）对特定NP的镇痛效果、安全性及耐受性的影响。寻找能有效激活镇痛通路而不加剧疼痛或损伤的“压力阈值”。除此之外，还需研究不同时长（如5、10、15 min/部位）对镇痛效果的累积效应和即时效应，寻找能产生最佳生物效应而不导致疲劳或不适的“时长阈值”。并可在未来采用神经行为学评分、步态分析、神经电生理等检测等方法来评估推拿干预后大鼠神经功能的恢复情况，以更全面地了解推拿对NP治疗作用，为推拿在神经康复领域的应用提供更充分的证据。
| [1] |
王瑗, 冯建梅, 卫白杨. 右美托咪定对坐骨神经慢性压迫损伤模型大鼠神经病理性疼痛的缓解作用及机制研究[J]. 陕西学杂志, 2021, 50(12): 1492-1495. |
| [2] |
KNEZEVIC N N, JOVANOVIC F, CANDIDO K D, et al. Oral pharmacotherapeutics for the management of peripheral neuropathic pain conditions-a review of clinical trials[J]. Expert Opinion on Pharmacotherapy, 2020, 21(18): 2231-2248. DOI:10.1080/14656566.2020.1801635 |
| [3] |
郭楠楠, 郭雪娇, 冯智英. 神经病理性疼痛分层治疗进展[J]. 中国疼痛医学杂志, 2022, 28(1): 49-52. |
| [4] |
刘志凤, 焦谊, 于天源, 等. 中医推拿的镇痛机制近十年研究进展[J]. 环球中医药, 2022, 15(3): 526-530. |
| [5] |
刘慧, 韩晓慧, 杨国帅, 等. 浅谈按法的由来与应用[J]. 内蒙古中医药, 2013, 32(28): 120-121. |
| [6] |
谢巧瑜, 廖军, 黄萍萍, 等. 点按法应用研究[J]. 河南中医, 2016, 36(6): 1084-1086. |
| [7] |
WANG J, WANG X W, ZHANG Y, et al. Ca2+ influx mediates the TRPV4-NO pathway in neuropathic hyperalgesia following chronic compression of the dorsal root ganglion[J]. Neuroscience Letters, 2015, 588: 159-165. DOI:10.1016/j.neulet.2015.01.010 |
| [8] |
WANG C, NING L P, WANG Y H, et al. Nuclear factor-kappa B mediates TRPV4-NO pathway involved in thermal hyperalgesia following chronic compression of the dorsal root ganglion in rats[J]. Behavioural Brain Research, 2011, 221(1): 19-24. DOI:10.1016/j.bbr.2011.02.028 |
| [9] |
RIHN J A, HILIBRAND A S, RADCLIFF K, et al. Duration of symptoms resulting from lumbar disc herniation: effect on treatment outcomes: analysis of the Spine Patient Outcomes Research Trial(SPORT)[J]. The Journal of Bone and Joint Surgery, 2011, 93(20): 1906-1914. |
| [10] |
HU S J, XING J L. An experimental model for chronic compression of dorsal root ganglion produced by intervertebral foramen stenosis in the rat[J]. Pain, 1998, 77(1): 15-23. DOI:10.1016/S0304-3959(98)00067-0 |
| [11] |
JENSEN T S, BARON R, HAANPÄÄ M, et al. A new definition of neuropathic pain[J]. Pain, 2011, 152(10): 2204-2205. DOI:10.1016/j.pain.2011.06.017 |
| [12] |
李宇翔, 庞军, 梁英业, 等. 推拿缓解神经病理性疼痛的作用机制研究进展[J]. 广西医学, 2022, 44(13): 1527-1531. |
| [13] |
高芳芳, 李婷婷, 崔艺敏, 等. 针刺作用下嘌呤受体P2X7对神经病理性疼痛的作用[J]. 陕西中医, 2023, 44(2): 271-273. |
| [14] |
钟青华, 杨松, 孟灵, 等. 电针颈夹脊穴对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角谷氨酸受体及趋化因子受体表达水平的影响[J]. 陕西中医, 2022, 43(5): 564-570. |
| [15] |
李之豪, 范兴良, 盛晓华, 等. 中医外治法干预激痛点对肌筋膜疼痛综合征的影响实验研究进展[J]. 世界中医药, 2024, 19(23): 3718-3721. |
| [16] |
ZHANG Z J, JIANG B C, GAO Y J. Chemokines in neuronglial cell interaction and pathogenesis of neuropathic pain[J]. Cellular and Molecular Life Sciences, 2017, 74(18): 3275-3291. DOI:10.1007/s00018-017-2513-1 |
| [17] |
GARRISON C J, DOUGHERTY P M, KAJANDER K C, et al. Staining of glial fibrillary acidic protein(GFAP) in lumbar spinal cord increases following a sciatic nerve constriction injury[J]. Brain Research, 1991, 565(1): 1-7. |
| [18] |
TANSLEY S, GU N, GUZMáN A U, et al. Microglia-mediated degradation of perineuronal nets promotes pain[J]. Science, 2022, 377(6601): 80-86. DOI:10.1126/science.abl6773 |
| [19] |
殷利军, 陈辉, 熊利泽. 神经病理性疼痛动物模型的选择与建立[J]. 中国疼痛医学杂志, 2023, 29(10): 725-730. |
| [20] |
ALESSANDRI-HABER N, DINA O A, JOSEPH E K, et al. Interaction of transient receptor potential vanilloid 4, integrin, and SRC tyrosine kinase in mechanical hyperalgesia[J]. The Journal of Neuroscience, 2008, 28(5): 1046-1057. DOI:10.1523/JNEUROSCI.4497-07.2008 |
| [21] |
TODAKA H, TANIGUCHI J, SATOH J, et al. Warm temperature-sensitive transient receptor potential vanilloid 4(TRPV4) plays an essential role in thermal hyperalgesia[J]. The Journal of Biological Chemistry, 2004, 279(34): 35133-35138. DOI:10.1074/jbc.M406260200 |
| [22] |
张杨, 王永慧, 丁欣利, 等. TRPV4在介导大鼠背根神经节持续受压后机械和热痛敏中的作用[J]. 中国康复医学杂志, 2010, 25(12): 1123-1130. |
| [23] |
LEE S H, ZHAO Y Q, RIBEIRO-DA-SILVA A, et al. Distinctive response of CNS glial cells in orofacial pain associated with injury, infection and inflammation[J]. Molecular Pain, 2010, 6: 79. |
| [24] |
GÓMEZ-NICOLA D, VALLE-ARGOS B, SUARDÍAZ M, et al. Role of IL -15 in spinal cord and sciatic nerve after chronic constriction injury: regulation of macrophage and Tcell infiltration[J]. Journal of Neurochemistry, 2008, 107(6): 1741-1752. DOI:10.1111/j.1471-4159.2008.05746.x |
| [25] |
刘扬. TRPV4通过激活胶质细胞参与次声引起的神经元损伤[D]. 西安: 第四军医大学, 2015.
|
| [26] |
LIU Z, YAO X, JIANG W, et al. Advanced oxidation protein products induce microglia-mediated neuroinflammation via MAPKs-NF-κB signaling pathway and pyroptosis after secondary spinal cord injury[J]. Journal of Neuroinflammation, 2020, 17(1): 90. DOI:10.1186/s12974-020-01751-2 |
| [27] |
韦英成, 董彤, 吴肖梅, 等. 推拿手法治疗神经根型颈椎病的研究进展[J]. 中医正骨, 2015, 27(10): 65-67. |
| [28] |
王艳国, 郭秀琴, 刘凯, 等. 推拿治疗腰椎间盘突出症随机对照试验的系统评价[J]. 中华中医药学刊, 2013, 31(8): 1638-1642. |
| [29] |
MCMORLAND G, SUTER E, CASHA S, et al. Manipulation or microdiskectomy for sciatica? A prospective randomized clinical study[J]. J Manipulative Physiol Ther, 2010, 33(8): 576-584. DOI:10.1016/j.jmpt.2010.08.013 |
| [30] |
萨出拉, 杨震杰, 于天源, 等. 推拿通过NF-κB/GT通路对minor CCI大鼠的镇痛启动机制研究[J]. 陕西中医, 2024, 45(8): 1016-1020. |
| [31] |
马一帆, 宁世鸿, 陈彦坤, 等. 针灸大成》中承山穴临床应用浅析[J]. 山西中医药大学学报, 2022, 23(3): 233-235, 240. |
| [32] |
WU S, WANG J, XU D S, et al. Neural anatomical connection between"Chengshan"(BL 57) acupoint and sciatic nerve in rats[J]. World Journal of Acupuncture-Moxibustion, 2021, 31(2): 129-135. DOI:10.1016/j.wjam.2021.02.002 |
| [33] |
曹乾安, 陈淑莹, 李琳慧, 等. 腰椎间盘突出症患者力敏腧穴客观特征案例分析[J]. 江西中医药大学学报, 2021, 33(3): 74-76. |
| [34] |
孟宪国, 岳寿伟, 陈睿, 等. 大鼠背根神经节在受压迫后TRPV4通道蛋白表达对痛阈的影响[J]. 临床医学工程, 2011, 18(4): 495-496. |