2026, Vol. 45文章信息
- 孟笑玮, 樊克涛
- MENG Xiaowei, FAN Ketao
- 黄柏配方颗粒对大鼠高尿酸血症的影响及机制研究
- Effects of Phellodendron chinense formula granules on hyperuricemia in rats and its mechanism
- 天津中医药大学学报, 2026, 45(4): 451-458
- Journal of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, 2026, 45(4): 451-458
- http://dx.doi.org/10.11656/j.issn.1673-9043.2026.04.11
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收稿日期: 2026-02-06
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2. 天津天重重型机器集团有限公司职工医院, 天津 300400
2. Staff Hospital of Tianjin Tianzhong Heavy Machinery Group Co. Ltd., Tianjin 300400, China
高尿酸血症患病率逐年上升，男性发病率高于女性，且呈现年轻化趋势，已经成为一个不可忽视的问题。高尿酸血症是由尿酸生成增多或（和）排泄减少所致的一种代谢紊乱性疾病，其发病机制复杂，主要涉及尿酸生成增多和排泄减少两个方面。
目前，治疗高尿酸血症的西药主要包括排尿酸药物、抑制尿酸生成药物、碱性药物、秋水仙碱、非甾体抗炎药、糖皮质激素等[1]。虽然疗效显著，但却出现一系列不良反应，且存在某些特殊人群不能使用等禁忌证问题，而中药具有多环节、多靶点、毒副作用小等优点，因此，近年来中医药治疗高尿酸血症备受青睐。
中药黄柏属清热燥湿类药物，性寒味苦，具有清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮的功效[2]。黄柏的主要化学成分为生物碱类，其中包括小檗碱、巴马汀、药根碱、黄柏碱等[3-4]，具有抗菌、抗炎、抗氧化、治疗痛风等多种药理作用。研究发现，黄柏可以降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平，抑制小鼠XOD活性[5]。早期实验亦发现黄柏的有效成分黄柏碱具有治疗肾炎的作用[6]。但对于黄柏治疗高尿酸血症作用机制的深入研究报道尚少，本研究以此为切入点，通过建立高尿酸血症大鼠模型，研究黄柏降尿酸的作用及机制，为黄柏治疗高尿酸血症和防治痛风提供科学理论依据。
1 材料与方法 1.1 实验动物健康雄性SD大鼠72只，体质量（200±10）g，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，许可证号：SCXK（京）2014-0004。动物饲养于中国医学科学院生物医学工程研究所，自由饮食、饮水，明暗交替光照各12 h，温度22~24 ℃，相对湿度40%~60%。适应性饲养1周后进行实验。本实验严格遵循动物实验伦理规范执行。
1.2 主要药品及试剂黄柏中药配方颗粒，产自江阴天江药业有限公司，产品批号：1505026。每袋装0.5 g，相当于饮片6 g。
别嘌醇商品名：Allopurinol，美国Sigma-aldrich公司，批号：081M1112V。规格：5 g/瓶。
酵母膏（Beijing Solarbio Science & Technology Co. Lid，规格：500 g/瓶，批号：20140317）；腺嘌呤（商品名：Adenine，美国Sigma-aldrich公司，规格：100 g/瓶，批号：SLBF5824V）；氧嗪酸钾（商品名：Oxonic acid potassium salt，美国Sigma-aldrich公司，规格：25 g/瓶，批号：STBD5759V）。
实验试剂见表 1。
| 主要试剂 | 批号/货号 | 生产公司 |
| 尿酸试剂盒 | 20141220 | 南京建成生物工程研究所 |
| 黄嘌呤氧化酶（XOD）测试盒 | 20141107 | 南京建成生物工程研究所 |
| 总蛋白定量测试盒（BCA法） | 20141121 | 南京建成生物工程研究所 |
| 尿素氮（BUN）试剂盒 | 20141216 | 南京建成生物工程研究所 |
| 肌酐（Cr）试剂盒 | 20141217 | 南京建成生物工程研究所 |
| 尿调蛋白（UMOD）检测试剂盒 | SEG918Ra | 武汉优尔生科技股份有限公司 |
| DNase/RNase-Free Deionized Water | 0341 | 天根生物科技有限公司 |
| PrimeScriptTM RT Master Mix | RR036A | TaKaRa-宝生物工程有限公司 |
| SYBRⓇ Premix Ex TapTM II | RR820A | TaKaRa-宝生物工程有限公司 |
见表 2。
| 主要仪器 | 型号 | 生产公司 |
| 多功能酶标仪 | Enpire | PerkinElmer公司 |
| 全自动生化分析仪 | Microlab300 | 荷兰威图公司 |
| 离心机 | Legend Micro 17 | Thermo Scientific公司 |
| 低温高速离心机 | Centrifuge 5415D | Eppendorf公司 |
| 超声破碎仪 | Uibra Cell | 美国SONICS公司 |
| 荧光/光学显微镜 | Olympus CKX41-F32FL | Olympus公司 |
| 日本数码拍摄系统 | Olympus DP71 | Olympus公司 |
| 核酸蛋白分析仪 | DU-800 | BECKMAN公司 |
| Bio-Rad PCR仪 | C1000 | 美国BIO-RAD公司 |
| Bio-Rad PCR仪 | CFX96 | 美国BIO-RAD公司 |
按照大鼠体质量随机分为以下6组：空白组、模型组、黄柏高、中、低剂量（18、9、4.5 g/kg）组、阳性药组，每组12只大鼠。
1.4.2 造模及给药实验采用酵母膏15 g/kg+腺嘌呤100 mg/kg+氧嗪酸钾300 mg/kg建立大鼠高尿酸血症模型[7]。除空白组灌胃相同体积纯水外，其余各组给予酵母膏15 g/kg+腺嘌呤100 mg/kg，灌胃体积为1.5 mL/100 g体质量；间隔4 h后灌胃受试药物，灌胃体积为1 mL/100 g体质量；最后1 d灌胃氧嗪酸钾，灌胃体积为1 mL/100 g体质量。灌胃氧嗪酸钾1 h后进行实验动物生物样本采集。
1.4.3 尿液代谢用代谢笼对大鼠进行24 h尿液代谢，禁食12 h，不禁水。收集尿液，测定尿量（UV），然后分离出上清尿液进行UA检测，其余取适量分装于标记好的0.5 mL离心管中，于-20 ℃冰箱保存备用。
1.5 相关指标检测方法 1.5.1 血清中相关指标测定采用微孔板法检测大鼠血清尿酸（SUA）。按照试剂盒提供的方法检测大鼠血清黄嘌呤氧化酶（XOD）的酶活力、血清肌酐（SCr）、血清尿素氮（SBUN）。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清尿调蛋白（UMOD）含量。
1.5.2 尿液中相关指标测定采用微孔板法检测大鼠尿液中尿酸（UUA）。按照试剂盒提供的方法检测大鼠尿肌酐（UCr）、尿液中尿素氮（UBUN）。采用ELISA法检测尿液UMOD含量。
1.5.3 尿酸排泄相关指标计算24 h尿酸排泄量（24 h UUA）=UV×UUA；尿酸排泄分数（FEUA）=UUA×SCr/（SUA×UCr）×100%。
1.5.4 肝组织中相关指标测定按照试剂盒提供的方法检测大鼠肝组织中XOD的酶活力。
1.5.5 肾脏病理学检测采用苏木精-伊红（HE）染色方法观察各组大鼠肾脏病理形态学改变，通过组织脱水、包埋、切片、染色、封片、图像采集，在光学显微镜下对病理切片进行观察，选取合适的视野拍照存图。
1.5.6 肾脏和肝脏组织相关基因的逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测采用TaKaRa公司设计合成的引物（表 3），取肾脏（或肝脏）组织50 mg，加1 mL Trizol充分研磨匀浆后提取总RNA，检测RNA浓度与纯度。按照PrimeScriptTM RT Master Mix试剂盒说明书逆转录合成cDNA。按照SYBRⓇ Premix Ex TapTM Ⅱ试剂盒说明书进行扩增，反应条件为95 ℃预变性30 s，95 ℃变性5 s，60 ℃退火30 s，40个循环，根据扩增曲线和熔解曲线判断PCR反应特异性，采用2-ΔΔCt法进行统计学分析。
| 引物名称 | 引物序列（5’-3’） | 长度（bp） |
| GAPDH | fwd5’-GGCACAGTCAAGGCTGAGAATG-3’ rev5’-ATGGTGGTGAAGACGCCAGTA-3’ |
143 |
| UMOD | fwd5’-AACTTGGGTCCCATCACACGA-3’ rev5’-CCATCAGGGTCAAAGTAGCTGAGAG-3’ |
121 |
| URAT1 | fwd5’’CTGCATTGCTGCTGCCTGA-3’ rev5’-GGAGCTTACAACCGGGCAGA-3’ |
136 |
| GLUT9 | fwd5’-TGGGAACACTGATGGTGAAGATG-3’ rev5’-GAAATGGCAAATCCGTTGTTGA-3’ |
82 |
| OAT1 | fwd5’-CATTGCAATCAACTGCATGACACTA-3’ rev5’-AGGAACTGGCCCAGGCTGTA-3’ |
105 |
| OAT3 | fwd5’’-GCTGGATCTACAACAGCACCAGAG-3’ rev5’-TGCCTGCCATGAAGATCGAC-3’’ |
105 |
| ABCG2 | fwd5’-TTTGGACTCAAGCACAGCAAATG-3’ rev5’-TGGAATACCGAGGCTGGTGAA-3’ |
101 |
| XOD | fwd5’-ATGCGGACCCTGAAACAACA-3’ rev5’-TGTTCTGAAGACGGTCATACTTGGA-3’ |
135 |
实验数据以均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS 17.0统计软件进行统计学分析。两组间比较采用两独立样本t检验，多组间均数比较采用单因素方差分析。P < 0.05表示差异有统计学意义。
2 实验结果 2.1 大鼠一般情况观察第1周预给药期间，6组大鼠毛发光泽，呼吸均匀有节律，精神状态佳，活动状态良好，饮食正常。第2周给药与造模同时进行，空白组状态同前，一切正常。模型组精神状态略差，喜静卧，活动量减少，饮食减少。黄柏各给药组精神状态较模型组有所改善，但进食量与模型组无明显差异。
2.2 黄柏配方颗粒对大鼠SUA和UUA的影响与空白组比较，模型组大鼠SUA水平升高（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各剂量组大鼠SUA水平均下降，且呈剂量依赖性趋势。其中黄柏18 g/kg组和9 g/kg组能够降低大鼠SUA水平（P < 0.05或P < 0.01）。
与空白组比较，模型组大鼠UUA水平降低（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各剂量组大鼠UUA水平均升高，且呈剂量依赖性趋势。黄柏18 g/kg组和9 g/kg组大鼠的UUA水平升高（P < 0.01）。见表 4。
| 组别 | 动物数 | 剂量 （g/kg） |
SUA （μmol/L） |
UUA （mg/L） |
| 空白组 | 12 | - | 120.05±11.48 | 406.17±75.08 |
| 模型组 | 12 | - | 258.34±28.27** | 231.30±36.32** |
| 黄柏高剂量组 | 12 | 18 | 215.44±25.16## | 315.40±59.12## |
| 黄柏中剂量组 | 12 | 9 | 220.53±38.01# | 313.16±66.47## |
| 黄柏低剂量组 | 12 | 4.5 | 240.00±31.18 | 237.70±77.10 |
| 阳性药组 | 12 | 0.01 | 212.18±22.92## | 281.99±48.44# |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，#P < 0.05，##P < 0.01。 | ||||
与空白组比较，模型组大鼠24 h UV增加（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各给药组大鼠24 h UV均减少，且呈剂量依赖性趋势；其中黄柏18 g/kg组和9 g/kg组24 h UV减少（P < 0.05或P < 0.01）。
与空白组比较，模型组大鼠24 h UUA增加（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各给药组大鼠24 h UUA均减少，其中黄柏18 g/kg组24 h UUA减少（P < 0.01）。
与空白组比较，模型组大鼠FEUA下降（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏18 g/kg组和4.5 g/kg组FEUA升高（P < 0.05或P < 0.01）。见表 5。
| 组别 | 动物数 | 剂量 （g/kg） |
24 h UV （mL） |
24 h UUA （mg） |
FEUA （%） |
| 空白组 | 12 | - | 9.45±3.92 | 4.37±0.93 | 11.47±2.21 |
| 模型组 | 12 | - | 29.30±7.96** | 6.46±1.42** | 8.65±0.69** |
| 黄柏高剂量组 | 12 | 18 | 19.11±5.65## | 4.89±0.95## | 10.33±1.21## |
| 黄柏中剂量组 | 12 | 9 | 22.05±5.66# | 5.90±0.86 | 9.72±1.82 |
| 黄柏低剂量组 | 12 | 4.5 | 27.88±8.95 | 6.23±0.99 | 9.96±1.33# |
| 阳性药组 | 12 | 0.01 | 15.78±4.97## | 4.82±1.23# | 11.22±2.52# |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，#P < 0.05，##P < 0.01。 | |||||
与空白组比较，模型组血清XOD酶活性升高（P < 0.01）。黄柏配方颗粒各给药组大鼠与模型组比较，血清XOD酶活性均下降，其中黄柏18 g/kg组和9 g/kg组比较，差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01），且呈剂量依赖性趋势。见表 6。
| 组别 | 动物数 | 剂量（g/kg） | XOD（U/L） |
| 空白组 | 12 | - | 19.16±3.40 |
| 模型组 | 12 | - | 29.32±3.96** |
| 黄柏高剂量组 | 12 | 18 | 21.20±2.94## |
| 黄柏中剂量组 | 12 | 9 | 24.26±2.80# |
| 黄柏低剂量组 | 12 | 4.5 | 27.16±5.07 |
| 阳性药组 | 12 | 0.01 | 29.26±2.98 |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，#P < 0.05，##P < 0.01。 | |||
与空白组比较，模型组大鼠肝组织XOD活性增加（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各给药组大鼠肝组织XOD酶活性均得到抑制（P < 0.05或P < 0.01）。见表 7。
| 组别 | 动物数 | 剂量（g/kg） | XOD（U/g） |
| 空白组 | 12 | - | 14.72±1.40 |
| 模型组 | 12 | - | 19.47±1.89** |
| 黄柏高剂量组 | 12 | 18 | 17.00±1.62# |
| 黄柏中剂量组 | 12 | 9 | 17.27±1.39# |
| 黄柏低剂量组 | 12 | 4.5 | 16.21±1.34## |
| 阳性药组 | 12 | 0.01 | 16.45±0.81## |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，#P < 0.05，##P < 0.01。 | |||
与空白组比较，模型组大鼠血清UMOD含量下降，同时尿液UMOD含量升高。与模型组比较，黄柏配方颗粒各给药组大鼠血清UMOD含量升高，同时尿液UMOD含量减少，其中黄柏18 g/kg组尿液UMOD含量较模型组显著下降（P < 0.01）。见表 8。
| 组别 | 动物数 | 剂量 （g/kg） |
SUMOD （ng/mL） |
UUMOD （ng/mL） |
| 空白组 | 12 | - | 1.80±0.76 | 0.16±0.04 |
| 模型组 | 12 | - | 1.46±0.54 | 0.18±0.04 |
| 黄柏高剂量组 | 12 | 18 | 1.62±0.64 | 0.13±0.01** |
| 黄柏中剂量组 | 12 | 9 | 1.75±0.39 | 0.15±0.03 |
| 黄柏低剂量组 | 12 | 4.5 | 1.77±0.35 | 0.17±0.06 |
| 阳性药组 | 12 | 0.01 | 1.79±0.64 | 0.19±0.06 |
| 注：与模型组比较，**P < 0.01。 | ||||
与空白组比较，模型组大鼠SCr和SBUN水平升高（P < 0.01），同时UCr和UBUN水平下降（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏各剂量组大鼠SCr和SBUN含量均下降（P < 0.05或P < 0.01）；同时UCr和UBUN含量均升高，其中黄柏18g/kg组和9g/kg组升高明显（P < 0.05或P < 0.01）。见表 9。
| 组别 | 动物数 | 剂量（g/kg） | SCr（μmol/L） | SBUN（mmol/L） | UCr（μmol/L） | UBUN（mmol/L） |
| 空白组 | 12 | - | 10.74±1.81 | 4.41±0.51 | 2199.98±530.11 | 514.78±92.42 |
| 模型组 | 12 | - | 16.02±4.23** | 6.15±1.10** | 692.37±119.55** | 324.98±53.33** |
| 黄柏高剂量组 | 12 | 18 | 11.05±2.29## | 4.41±0.79## | 1063.76±276.33## | 386.78±62.75# |
| 黄柏中剂量组 | 12 | 9 | 11.48±0.97## | 5.02±0.84# | 991.99±304.88# | 333.37±66.19 |
| 黄柏低剂量组 | 12 | 4.5 | 11.86±2.38# | 4.79±0.99# | 821.65±190.69 | 325.33±104.09 |
| 阳性药组 | 12 | 0.01 | 12.44±1.29# | 5.02±0.75# | 838.05±117.95# | 354.42±79.66 |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，#P < 0.05，##P < 0.01。 | ||||||
模型组大鼠肾脏质量及系数均显著高于空白对照组（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏18 g/kg组和9 g/kg组大鼠肾脏质量及系数均显著降低（P < 0.01或P < 0.05）。见表 10。
| 组别 | 动物数 | 剂量 （g/kg） |
肾脏质量 （g） |
肾脏系数 （%） |
| 空白组 | 12 | - | 1.73±0.09 | 0.80±0.06 |
| 模型组 | 12 | - | 2.40±0.25** | 1.11±0.10** |
| 黄柏高剂量组 | 12 | 18 | 2.11±0.19## | 0.99±0.14# |
| 黄柏中剂量组 | 12 | 9 | 2.20±0.14# | 1.02±0.09# |
| 黄柏低剂量组 | 12 | 4.5 | 2.30±0.22 | 1.11±0.13 |
| 阳性药组 | 12 | 0.01 | 2.10±0.13## | 0.98±0.09## |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，#P < 0.05，##P < 0.01。 | ||||
与空白对照组比较，模型组大鼠肝脏质量及系数均显著增大（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各剂量组不同程度降低了高尿酸血症大鼠肝脏质量及系数，但差异无统计学意义（P>0.05）。见表 11。
| 组别 | 动物数 | 剂量 （g/kg） |
肝脏质量 （g） |
肝脏系数 （%） |
| 空白组 | 12 | - | 6.10±0.55 | 2.78±0.19 |
| 模型组 | 12 | - | 6.69±0.53* | 3.21±0.21** |
| 黄柏高剂量组 | 12 | 18 | 7.13±0.79 | 3.05±0.39 |
| 黄柏中剂量组 | 12 | 9 | 6.62±0.39 | 3.12±0.14 |
| 黄柏低剂量组 | 12 | 4.5 | 6.54±0.67 | 3.16±0.25 |
| 阳性药组 | 12 | 0.01 | 6.64±0.50 | 3.05±0.17 |
| 注：与空白组比较，*P < 0.05，**P < 0.01。 | ||||
空白组大鼠肾小球结构正常，肾小管、间质无异常，肾小球周围毛细血管开放良好。模型组大鼠肾小球萎缩，肾小管扩张，肾小管内存在较多蛋白管型。黄柏配方颗粒各剂量组大鼠肾小球无萎缩或轻微萎缩，肾小管扩张改善，散在较少的蛋白管型。见图 1。
|
| 图 1 黄柏对高尿酸血症大鼠肾脏病理变化的影响（HE，×500） |
与空白组比较，模型组大鼠肾脏OAT1基因表达下调（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各剂量组均上调OAT1基因表达（P < 0.01）。见表 12。
| 组别 | 剂量（g/kg） | OAT1 mRNA表达 |
| 空白组 | - | 1.01±0.15 |
| 模型组 | - | 0.25±0.01** |
| 黄柏高剂量组 | 18 | 0.81±0.13## |
| 黄柏中剂量组 | 9 | 1.28±0.05## |
| 黄柏低剂量组 | 4.5 | 1.11±0.26## |
| 阳性药组 | 0.01 | 1.29±0.33## |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，##P < 0.01。 | ||
与空白组比较，模型组大鼠肾脏OAT3基因表达下调（P < 0.01）。
与模型组比较，黄柏配方颗粒各剂量组均能上调OAT3基因表达（P < 0.01）。见表 13。
| 组别 | 剂量（g/kg） | OAT3 mRNA表达 |
| Control | - | 1.00±0.06 |
| Model | - | 0.70±0.03** |
| HB | 18 | 1.23±0.10## |
| HB | 9 | 1.64±0.14## |
| HB | 4.5 | 1.03±0.07## |
| Allopurinol | 0.01 | 0.93±0.06## |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，##P < 0.01。 | ||
与空白组比较，模型组大鼠肾脏ABCG2基因表达下调（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各剂量组均能上调ABCG2基因表达。见表 14。
| 组别 | 剂量（g/kg） | ABCG2 mRNA表达 |
| 空白组 | - | 1.00±0.08 |
| 模型组 | - | 0.73±0.07** |
| 黄柏高剂量组 | 18 | 1.98±0.11## |
| 黄柏中剂量组 | 9 | 3.80±0.07## |
| 黄柏低剂量组 | 4.5 | 3.29±0.18## |
| 阳性药组 | 0.01 | 2.46±0.51## |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，##P < 0.01。 | ||
模型组大鼠较空白组大鼠肾脏URAT1基因表达下调（P < 0.05）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各剂量组均能上调大鼠肾脏URAT1基因表达水平（P < 0.05或P < 0.01）。见表 15。
| 组别 | 剂量（g/kg） | URAT1 mRNA表达 |
| 空白组 | - | 1.00±0.03 |
| 模型组 | - | 0.71±0.16* |
| 黄柏高剂量组 | 18 | 1.09±0.07# |
| 黄柏中剂量组 | 9 | 3.23±0.24## |
| 黄柏低剂量组 | 4.5 | 2.06±0.15## |
| 阳性药组 | 0.01 | 3.89±0.38## |
| 注：与空白组比较，*P < 0.05；与模型组比较，#P < 0.05，##P < 0.01。 | ||
与空白组比较，模型组大鼠GLUT9基因表达上调（P < 0.01）。黄柏18 g/kg组和9 g/kg组与模型组比较，肾脏GLUT9基因表达水平下调（P < 0.01）。见表 16。
| 组别 | 剂量（g/kg） | GLUT9 mRNA表达 |
| 空白组 | - | 1.00±0.03 |
| 模型组 | - | 1.78±0.15** |
| 黄柏高剂量组 | 18 | 1.12±0.10## |
| 黄柏中剂量组 | 9 | 1.44±0.08## |
| 黄柏低剂量组 | 4.5 | 1.88±0.17 |
| 阳性药组 | 0.01 | 1.52±0.06# |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，#P < 0.05，##P < 0.01。 | ||
与空白组比较，模型组大鼠肾脏UMOD基因表达下调（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各剂量组均能上调大鼠肾脏UMOD基因表达（P < 0.01）。见表 17。
| 组别 | 剂量（g/kg） | UMOD mRNA表达 |
| 空白组 | - | 1.00±0.08 |
| 模型组 | - | 0.51±0.06** |
| 黄柏高剂量组 | 18 | 1.37±0.22## |
| 黄柏中剂量组 | 9 | 4.44±0.61## |
| 黄柏低剂量组 | 4.5 | 9.08±0.69## |
| 阳性药组 | 0.01 | 5.53±1.15## |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，##P < 0.01。 | ||
与空白组比较，模型组大鼠肝脏XOD基因表达上调（P < 0.01）。与模型组比较，黄柏配方颗粒各剂量组均能下调XOD基因表达水平，其中黄柏18 g/kg组和9 g/kg组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表 18。
| 组别 | 剂量（g/kg） | XOD mRNA表达 |
| 空白组 | - | 1.00±0.06 |
| 模型组 | - | 1.87±0.34** |
| 黄柏高剂量组 | 18 | 1.14±0.11# |
| 黄柏中剂量组 | 9 | 1.21±0.10# |
| 黄柏低剂量组 | 4.5 | 1.52±0.23 |
| 阳性药组 | 0.01 | 1.22±0.03# |
| 注：与空白组比较，**P < 0.01；与模型组比较，#P < 0.05。 | ||
高尿酸血症的发病机制复杂，目前公认的发病机制包括肝脏尿酸合成酶基因突变和肾脏尿酸盐转运蛋白异常。肾脏是负责尿酸排泄的主要器官，肾脏上的尿酸盐转运蛋白OAT1、OAT3和ABCG2等负责尿酸的分泌，URAT1、GLUT9等负责尿酸的重吸收；肝脏是负责尿酸合成的主要器官，肝脏中的XOD是尿酸合成过程中重要的氧化酶。研究表明，肝脏中XOD活性升高，尿酸生成增多[8]；肾脏中URAT1、GLUT9、UMOD表达水平上升，对尿酸的重吸收增加[9-10]；肾脏中OAT1、OAT3、ABCG2表达水平下降，对尿酸的排泄减少[11-12]，最终导致高尿酸血症的发生。
本研究中，大鼠造模后，模型组大鼠SUA、24 h UUA显著升高，同时FEUA明显降低；与模型组比较，黄柏18 g/kg剂量组大鼠SUA、24 h UUA均显著减少，FEUA明显增加；黄柏9 g/kg组大鼠SUA水平明显下降，提示黄柏配方颗粒具有良好的降尿酸作用。
XOD是尿酸在肝脏合成过程中重要的氧化酶之一，XOD促进次黄嘌呤合成黄嘌呤，进而生成尿酸。XOD活性升高，含量增加，大量释放入血，从而使得血清中XOD水平显著升高。因此，检测血清、肝脏中XOD含量也是评价高尿酸血症理想的指标之一。本研究中，黄柏配方颗粒各剂量组均能显著降低大鼠血清和肝组织XOD活性，并且可以不同程度下调XOD基因表达水平。提示黄柏配方颗粒可以起到很好的抑制XOD活性作用。
文献报道高尿酸血症小鼠SCr、SBUN水平明显升高，肾脏组织肾小管轻度水肿、肾小管上皮细胞空泡变形，表明高尿酸血症小鼠肾脏损伤并伴有肾功能水平下降[13]。本实验中，模型组大鼠SCr、SBUN水平显著升高，而黄柏配方颗粒各剂量组均能明显降低大鼠SCr、SBUN水平。显微镜下观察大鼠肾组织HE病理切片，模型组大鼠肾小球萎缩，肾小管扩张，肾小管内存在较多蛋白管型。黄柏配方颗粒各剂量组大鼠肾小球无萎缩或轻微萎缩，肾小管扩张改善，散在较少的蛋白管型。提示黄柏配方颗粒具有很好的肾脏保护作用。
肾脏是尿酸的主要排泄器官，依靠肾脏上的尿酸盐转运蛋白对尿酸进行分泌与重吸收。有学者对部分相关尿酸盐转运蛋白进行了综述，归纳总结了URAT1、GLUT9、OAT1、OAT3、ABCG2等转运体的编码基因、表达位置、主要功能[14-23]。URAT1主要表达于肾皮质近曲小管上皮细胞的刷状缘膜；GLUT9主要表达于近曲小管和集合管，两者均负责尿酸的重吸收。OAT1和OAT3都属于OATs家族，主要表达于肾脏；ABCG2主要位于肾脏和肝脏上皮细胞的管腔侧膜，3者均负责尿酸分泌。本实验显示，黄柏配方颗粒各剂量组大鼠URAT1、UMOD、OAT1、OAT3、ABCG2 mRNA表达水平较模型组均明显上调，GLUT9 mRNA表达则显著下调。其中URAT1和UMOD的实验结果与文献报道不一致，推测其可能的部分原因是机体进行了代偿性调节，进而对肾脏发挥保护作用。以上实验结果提示黄柏配方颗粒可能通过调节肾脏中尿酸盐转运蛋白的基因表达来发挥降尿酸作用。
综上所述，本研究证实黄柏配方颗粒对高尿酸血症的多个病理反应均具有显著的改善作用，发挥了良好的降尿酸作用，其药理作用机制与其调控的肾脏尿酸盐转运蛋白和肝脏XOD相关，为扩大黄柏的临床应用范围提供了科学全面的理论依据，为具体阐明黄柏治疗高尿酸血症的作用机制奠定了实验基础，有利于后续更加深入的实验研究。
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